Окраска по Ожешко - раздел Биология, УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС ПО «МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ» Метод Основан На Принципе Окраски Кислотоустойчивых Бактерий. Отличие Заключа...
Метод основан на принципе окраски кислотоустойчивых бактерий. Отличие заключается в предварительной обработке микроорганизмов 0,5 % раствором соляной кислотой, что облегчает окраску спор карболовым фуксином. Споры кислотоустойчивы, поэтому красятся в красный цвет.
Методика окраски по Ожешко:
1. На нефиксированный мазок нанести 0,5 % раствор соляной кислотой и подогреть на пламени в течение 2-3 мин.
2. Кислоту слить, препарат промыть водой, просушить и фиксировать над пламенем. Затем окрасить по Цилю-Нильсену. Споры бактерий приобретают красный цвет, а вегетативные формы - синий.
Окраска по Романовского-Гимза.
Методика окраски по Романовскому-Гимза:
Краска Романовского-Гимза состоит из метиленового синего, эозина и азура.
1. На мазок наносят рабочий раствор красителя (2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды) на 10-20 мин.
2. Препарат промывают водой и высушивают на воздухе.
Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, боррелии - в фиолетовый цвет, лептоспиры - в розовый цвет. Сапрофитные (непатогенные) формы окрашиваются в синий цвет. Морфологию спирохет изучают также в живом состоянии в фазово-контрастном или темнопольном микроскопе. Хорошим методом выявления спирохет является серебрение по Морозову.
К работе № 3 Теоретическая справка
Исследование микроорганизмов в живом состоянии для изучения форм и подвижности.
Техника приготовления препаратов «висячая» и «раздавленная» капли
1 этап. Обезжирить стекло, протерев рабочую поверхность стекла мылом, которое затем удаляют салфеткой.
2 этап.
Препарат «раздавленная» капля
| Препарат «висячая» капля
|
Если микроорганизмы выращены на плотной питательной среде, то на обезжиренное стекло наносят каплю физиологического раствора и в нее вносят петлей небольшое количество мате-риала для исследования. Затем на каплю накла-дывают покровное стекло таким образом, чтобы между ним и предметным стеклом не было пузырьков воздуха.
Если культура выращена на жидкой питатель-ной среде, то для приготовления препарата используют пастеровскую пипетку, с помощью которой каплю культуры наносят на предметное стекло.
| Препарат готовят аналогичным образом, но каплю культуры наносят на покровное стекло, которое затем накладывают на предметное стекло с лункой, края которой смазаны вазели-ном. Стекла склеиваются и получается герметически закрытая камера, в которой капля долго не высыхает.
|
Все темы данного раздела:
Принятые сокращения и условные обозначения
Аг - антиген
Ат - антитело
БАК - бактерицидная активность кожи
БАСК - бактерицидная активность сыворотки крови
БГКП - бактерии группы кишечная палочка
В
Правила организации и оборудования микробиологической лаборатории (техника безопасности). Морфология эукариотов (грибы)
Цель занятия:
1. Ознакомиться с принципами организации и оборудования бактериологической лаборатории, правилами работы и соблюдением техники безопасности п
Структура бактериологической лаборатории
Работа на кафедре микробиологии и в бактериологической лаборатории требует соблюдения специальных правил, так как исследования проводятся с использованием культур патогенных микроорганизмов и зараз
Оборудование рабочего места бактериолога
На рабочем столе должно быть все необходимое для работы:
· микроскоп
· иммерсионное масло
· бактериологические петли
· спиртовка
· набо
В случае воспламенения спирта огонь тушить асбестовой тканью, полотенцем.
Обязанности дежурного:
• -подготовить кабинет к работе - проверить состояния рабочих мест и дефекты уборки, проветрить помещение;
• - пробирки и
Морфологические особенности грибов
препарат
рисунок
описание
Морфология грибов и методы их изучения
I. Грибы – эукариоты. Они имеют хорошо оформленное ядро, митохондрии и вакуоли. Грибная клетка содержит одно или несколько ядер. Клеточная стенка грибов состоит на 80-90% из полисахаридов (45% прих
Методы изучения
1.Микроскопический – изучение морфологических и тинкториальных свойств.
Препараты:
а) Нативные. Для приготовления препаратов
Основные характеристики светового микроскопа
Принцип иммерсионного метода микроскопии
Особенности фазово-контрастной микроскопии
Особенности темнопольной микроскопии
Особенности люминесцентной микроскопии
Основные характеристики электронного микроскопа
Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы
Микроскопический метод исследования - это изучение под микроскопом окрашенных препаратов из исследуемого материала:
Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра.
Разрешающая способность микроскопа определяется размером наименьшего объекта, который можно увидеть в данный микроскоп. Для световых микроскопов разрешающая способность – 0,2 мкм, для электронного
ЗАНЯТИЯЕ 1.1.2
Морфология прокариот. Методы выявления: окраска, микроскопия
Цель занятия:
изучить морфологию прокариот; особенности ультраструктуры бактерий, фун
Работа № 2. Изучение строения бактериальной клетки и структуры клеточной стенки
Цель:изучить строение бактериальной клетки и структуру клеточной стенки бактерий; освоить технику приготовления фиксированных препаратов.
Самостоятельная работа:
Окраска по Цилю-Нильсену.
Применяют для дифференциации кислотоустойчивых и некислотоустойчивых микроорганизмов. Кислотоустойчивость бактерий обусловлена повышенным содержанием в клеточной стенке и цитоплазме липидов,
Самостоятельная работа во внеурочное время
1. Дайте определение:
а) морфологические свойства - __________________________________________________
____________________________________________________________________________
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭУКАРИОТИЧЕСКОЙ И ПРОКАРИОТИЧЕСКОЙ КЛЕТКИ
Признак
Эукариоты
Прокариоты
1. Хранение генетической информации
ОСНОВНЫЕ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ
Формы бактерий
Рисунок
Морфологические и тикториальные свойства
Стрептококк
&nb
ЗАНЯТИЕ 1.1.3
Сравнительная морфология микроорганизмов: актиномицеты, спирохеты, микоплазмы, хламидии, риккетсии, вирусы
Цель: изучить морфологию актиномицетов, спирохе
Работа№1. Актиномицеты. Методы выявления
Цель:изучить морфологию актиномицет (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение актиномицетов. Объясн
Методы выявления актиномицет
По химическому составу оболочка актиномицетов близка к оболочке бактерий, поэтому они окрашиваются анилиновыми красителями. Обычно их окрашивают простыми методами или по Граму. Актиномицеты являютс
Работа№2. Спирохеты. Методы выявления
Цель:изучить морфологию спирохет: боррелий, лептоспир и трепонем (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение спирохе
L. interogans (лептоспира)
Результат:
Ультраструктура спирохет
Вывод:
Методы выявления спирохет (трепонем, боррелий, лептоспир)
Оболочка спирохет тонкая, эластичная, содержит большое количество липопротеидов до 70 - 80% и тонкий фрагментированный слой пептидогликана. Обычными методами трепонемы не окрашиваются, так как при
Работа №3. Микоплазмы. Методы выявления
Цель:изучить морфологию микоплазм (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа: зарисуйте и опишите строение микоплазм. Какие методы применяются для
Методы выявления микоплазм
Микоплазмы –это прокариоты малых размеров, имеют только цитоплазматическую мембрану и не способны синтезировать пептидогликан. Это полиморфные микроорганизмы, по форме представляют
Хламидии (морфология, жизненный цикл хламидий).
Хламидии - мелкие, чувствительные к антибиотикам бактерии диаметром около 0,2-1,5 мкм, которые развиваются только внутри живых клеток («облигатные внутриклеточные паразиты») и вызывают широкий спек
Методы выявления хламидий
Хламидии обычно выявляются в клетках плоского, а не цилиндрического эпителия. Клетки с хламидиями располагаются группами по 4-6 штук; хроматин в них распределен причудливо, грубые его нагромождения
Работа№5. Морфология риккетсии и цикл развития
Цель:изучить морфологию риккетсий (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа:зарисовать и описать морфологию риккетсий. Какие мето
Методы выявления риккетсий
Риккетсии –грамотрицательные микроорганизмы малых размеров. Они занимают промежуточное положение между бактериями и вирусами. С бактериями они сходны по морфологии. Внутриклеточное
Работа №6. Вирусы. Методы выявления
Цель:изучить морфологические особенности вирусов.
Самостоятельная работа: Опишите строение вирусов. Перечислите основные морфологические с
Самостоятельная работа во внеурочное время
Используя лекционный материал, учебник, атлас и теоретическую справку охарактеризовать вирусы.
1. Заполните таблицу
ПРИНЦИПЫ КЛАССИФИКАЦИИ ВИРУСОВ
Взаимодействие бактериофага с оболочкой бактерии
ЗАНЯТИЕ 1.1.4
Физиология микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики
Цель занятий: изучить условия и методы культивирования микроорганизмов. Освоить бактериолог
Теоретическая справка
Работа № 1
Для культивирования бактерий применяют питательные среды. Они могут быть естественными (молоко, морковь, картофель), искусственными (готовят специально). Питател
Дифференциально-диагностические среды.
1. ПС для культивирования и изучения биохимических свойств.
1.1. Среды Эндо,Левина, Плоскирева. Используют как дифференциально-диагностические
Теоретическая справка
Работа № 2
Микроорганизмам как всему живому присущи три основные физиологические функции: питание, дыхание и размножение.
Питание необходимо для синтеза в клетке всех органических
Работа № 3. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах
Цель:изучить характер роста бактерий на жидких питательных средах; изучить особенности роста микроорганизмов
Самостоятельная работ:описать характер роста
Теоретическая справка
Работа № 3
Дыхание микроорганизмов – биологическое окисление субстрата с выделением необходимой для метаболизма энергии. По типу дыхания микроорганизмы делятся на 3 основны
Работа № 4. Техника посева на питательные среды
Цель:ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа:ра
Метод Дригальского
Стерильной пипеткой материал помещают на поверхность МПА в чашку Петри
&
А) Сахаролитическая и протеолитическая активность
вид м/о
Сахаролитическая активность
Протеолитическая активность
лактоза
Б) Каталазная активность аэробов
Цель:изучить каталазную активность микроорганизмов; определить тип дыхания исследуемой культуры (см. теоретическую справку)
Самостоятельная работа:определ
Теоретическая справка
Работа № 5
Б) Каталазная активность. Каталаза - это фермент, катализирующий реакцию разложения перекиси водорода с образованием воды и кислорода. Ка
Теоретическая справка
Бактериологический метод является основным при диагностике инфекционных заболеваний. Его сущность заключается в определении вида возбудителя инфекции, следовательно, можно поставить
Охарактеризовать все фазы процесса
ЗАНЯТИЕ 1.1.5
Физиология микробов. Бактериологический метод диагностики (продолжение). Методы культивирования облигатных внутриклеточных паразитов.
Цель занятия:
изучить методы
Работа №2. Методы создания анаэробных условий
Цель: изучить методы создания анаэробных условий (см.теоретическую справку)
Самостоятельная работа: рассмотреть предложенные питательные среды и оборудова
Работа №3. Биохимическая активность анаэробов
Цель: изучить биохимическую активность анаэробных бактерий.
Самостоятельная работа: указать какая биохимическая активность анаэробов проявляется на демонстрационных средах
Куриный эмбрион
1. Воздушное пространство
2. Отверстие в скорлупе
3. Скорлупная оболо
Культура тканей
первичные перевиваемые полуперевиваемые
Лабораторные животные
Методы создания анаэробных условий
1) Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
•Посев в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества:
В качестве ред
К работе № 3
Культивирование вирусов
Для культивирования вирусов используют:
1) Куриные эмбрионы. Куриный эмбрион - удобная модель для культивирования вирусов с целью получени
Самостоятельная работа во внеурочное время
Что изображено на фотографии?
Цель применения устройства? Какие
Новости и инфо для студентов