Бактериологическое исследование спинномозговой жидкости (СМЖ) - раздел Философия, МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ Для Бактериологического Анализа Обычно Используют Смж, Взятую При Люмбальной ...
Для бактериологического анализа обычно используют СМЖ, взятую при люмбальной пункции или при пункции боковых желудочков мозга. СМЖ берут как можно раньше, желательно до начала антибактериального лечения. Ликвор из шприца без иглы над спиртовкой вносят в стерильную центрифужную пробирку в количестве 1-2 мл. Ликвор для исследования немедленно доставляют в лабораторию, при отсутствии такой возможности материал сохраняют при 37°С в течение нескольких часов. Для пересылки материала используют изотермальные ящики, где поддерживается температура 37°С.
С целью выделения более широкого спектра возбудителей, производят посев ликвора на питательные среды в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на сывороточный агар, 5%-ный КА, «шоколадный» агар и МПА.
Проводят посев 0,1 мл гнойного ликвора или 0,1 мл суспендированного в стерильной воде осадка из СМЖ на чашки Петри. Капли материала слегка растирают стерильным шпателем Дригальского по поверхности агара. После этого чашку с МПА помещают в термостат в обычной атмосфере при 37°С, а чашки с сывороточным и «шоколадным» агаром инкубируют при повышенной концентрации СО2. Для этого чашки помещают в эксикатор, в котором создается повышенное содержание СО2 за счет горящей свечи или СО2-инкубатор. Инкубация при повышенных концентрациях СО2 способствует выявлению патогенных нейссерий, пневмококков, листерий и др.
В пробирку, к оставшемуся от посева осадку, добавляют 5 мл стерильного 0,1%-ного полужидкого агара и помещают в термостат для накопления. На второй день просматривают сделанные накануне посевы СМЖ. При появлении роста на плотных питательных средах изучают характер роста и мазки из выросших колоний, окрашенные по Граму. Проводят отсевы на элективные среды для получения чистой культуры с последующей их идентификацией.
СМЖ является стерильной средой, поэтому выделение любого микроорганизма должно расцениваться как положительный результат. Редко нахождение условно-патогенных микроорганизмов и сапрофитов, которые ранее никогда не выявлялись, может вызвать сомнение и расцениваться как загрязнение или в момент взятия пробы, или при повторных высевах со среды обогащения. В таких случаях большое значение имеют клинические данные.
При отсутствии роста колоний на твердых средах, делают высев из среды накопления на чашки с сывороточным и кровяным агаром. Твердые среды с посевами ликвора при отсутствии роста на протяжении 24 ч инкубируют в течение 3-5 дней. При отрицательных результатах высевы повторяют через 5 дней.
Все темы данного раздела:
Информационно-издательский центр ХМГМА
УДК 616 – 093/ – 098 : 616 – 08: 616 – 053.2 : 614.4 (075.8)
ББК 52.64 + 51.1 (2) + 57.3
Рекомендовано к изд
Тематический План практических занятий
Раздел I. Возбудители бактериальных и грибковых инфекций
1.
СТАФИЛОКОККИ. СТРЕПТОКОККИ. Микробиологиче
Возбудители бактериальных и грибковых инфекционных болезней
1. Систематическое положение
а) Семейство, род вид (по латыни).
б) Серотипы, если антигенная структура важна для эпидемиологии, клиники и идентификации возбудителя
Возбудители вирусных инфекционных болезней
1. Систематическое положение
а) Семейство, род вид (по латыни).
б) Серотипы, если антигенная структура важна для эпидемиологии, клиники и идентификац
Образец экзаменационного билета
200 баллов
ГБОУ ВПО ХМАО-ЮГРЫ
Ханты-Мансийская государственная медицинская АКАДЕМИЯ
-----------
Основные термины и понятия (10 б
Нормировка рейтинга к стандартной оценке
Оценка
%
Баллы
«Отлично»
>80
«Хорошо»
70-80
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд»
Антибиотикогра
Й день исследования
Исследуемый материал
Среды для посева
Условия
культивирования и техника посева
Результат
Вывод
Сероидентификации в реакции преципитации по Ленсфильд
Групповые сыворотки
Вывод
А
В
С
D
F
&n
Видовая идентификация стафилококков
Вид
Ферментация
Плазмокоагулаза
Гемолиз
Лецитиназа
Резистентность
маннита
Дифференциация стрептококков и энтерококков
Вид,
серогруппа
Гемолиз
Лизис желчью
Ферментация инулина
Молоко
Пробы на
устойчивость
ЗАДАНИЯ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ
1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Neisseria meningitidis и Streptococcus pneumoniae. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.
 
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель: Освоить микробиологическую диагностику менингококкового менингита.
Задача. Больной К
Справочный материал для оформления протоколов
Таблица 1
Дифференцированные свойства некоторых видов рода Neisseria
Вид
Признак
meningitidi
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд»
Антибиотикогра
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Определение количества легионелл в воде
Для определения количества легионелл в исследуемой пробе необходимо подсчитать число колоний, выросших на агаре БУДРАГ. Для расчета использов
Справочный материал для оформления протоколов
Таблица 1
Дифференцированные свойства некоторых видов рода Neisseria
Вид
Признак
meningitidi
ЗАДАНИЯ для подготовки
1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Мycobacterium tuberculosis (окраска по Цилю-Нильсену), Corynebacterium diphtheriae (окраска по Леффлеру) и Actinomyces israeil
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель:Освоить бактериологический метод диагностики туберкулеза.
Задача. Больные Б. 67 лет и Г. 55 лет, клин
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Исследуемый материал наносят толстым слоем на несколько стерильных предметных стекол. Высушенный препарат берут стерильным пинцетом и погружают на 15 мин в 2%-ную серную кислоту, а затем – в стерил
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд»
Преципитация п
Дифференциация коринебактерий
Вид коринебактерий
Токсигенность
Глюкоза
Сахароза
Крахмал
Цистиназа
Мочевина
Ред
Практическая работа
Р а б о т а №1
Задание. Используя аннотации к питательным средам, внести в протокол описание сред, применяемых для диагностики кишечных инфекций.
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на средах Гисса и Ресселя
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на средах Гисса и Ресселя
Серологическая диагностика острой дизентерии
День
исследования
Разведения сыворотки
Контроль
1 : 100
1 : 200
1 : 400
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на среде Гисса и Ресселя
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
При интерпретации результатов реакции Видаля необходимо помнить о том, что реакция может быть положительной не только у больных (инфекционный Видаль), но и при любом лихорадочном состоянии, если бо
Результаты реакции Видаля больного П.
Диагностикум
Разведения сыворотки
Контроль
1 : 100
1 : 200
1 : 400
1 : 800
Результаты реакции Видаля больного Т.
Диагностикум
Разведения сыворотки
Контроль
1 : 100
1 : 200
1 : 400
1 : 800
Определение биовара холерного вибриона
Рост на среде
с полимиксином
Агглютинация
куриных
эритроцитов
Чувствительность к фагу
Реакция Фогес-Проскауэра
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Для выявления Helicobacter pylori в тканях слизистой оболочки желудка используют различные варианты уреазного теста, основанного на способности этих бактерий продуцировать большое количество
Сахаролитические свойства вибрионов на триаде Хейберга
Группа
Углеводы
сахароза
манноза
арабиноза
+
+
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на средах Гисса
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на средах Гисса и Ресселя
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» на средах Гисса и Ресселя
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
«Биохимический ряд» AUXACOLOR
Анти
Дифференциация некоторых условно-патогенных грамотрицательных бактерий
Род и вид
Признак
Escherichia coli
Proteus vulgaris
Proteus mirabilis
Klebsiella pneumoniae
Интерпретация результатов исследования при кандидозе
Для количественной оценки результатов, полученных при штриховом посеве тампоном на 1/2 чашки используют следующие критерии:
– степень I – очень скудный рост (на плотных питательных средах
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель: Освоить серологический метод диагностики бруцеллеза (реакция Хадделсона и Райта).
Задача.
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
Идентификация
Чувствительность к с
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Реакцию ставят в узких пробирках. Обязательным условием правильной постановки является медленное наслаивание по стенке пастеровской пипеткой физиологического раствора и исследуемого термоэкстракта,
ЗАДАНИЯ для подготовки
1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Clostridium perfringenes, C. tetani, C. botulinum (окраска по Граму) и неклостридиальных анаэробов Bacteroides fragilis, Fusob
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель:Изучить особенности бактериологического метода диагностики ботулизма.
В инфекционную больницу поступил
Й день исследования
Описание роста чистой культуры
Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)
Рост на среде с
Тест на аэротолера
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель: Освоить серологический метод диагностики сифилиса (реакция Вассермана и РСК).
Задача.
ЗАДАНИЯ для подготовки
1. Заполнить таблицу «Сравнительная характеристика важнейших венерических и урогенитальных заболеваний»:
Сифилис
Гонорея
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель: Освоить навык оценки результатов РСК в серологической диагностике сыпного тифа.
Задача.
Энтеробактерии, вибрионы и кампилобактерии
Клинические материалы, используемые для бактериологических исследований при ОКИ, условия, способы отбора и транспортировки, сроки посева на питательные среды.
Основные факторы патогенности
Возбудители зоонозных инфекций
Определение понятия «зоонозная инфекция». Контагиозные и неконтагиозные зоонозы. Классификация зоонозов по этиологическому принципу. Эндемичные районы по зоонозным инфекциям в РФ (особенно в ХМАО-Ю
Возбудители оппортунистических и госпитальных инфекций
Определение понятий «госпитальная инфекция» и «госпитальный штамм». Общая характеристика возбудителей госпитальных инфекции. Пути формирования и маркеры госпитальных штаммов. Эпидемиология ГИ: исто
Патогенные кокки
Стафилококки – возбудители гнойно-воспалительных инфекций человека
Таксономическое положение стафилококков (семейство, род, виды). Морфологические, тинкториальные и культу
ПАТОГЕННЫЕ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ
Клостридии – возбудители газовой гангрены
Таксономическое положение возбудителей газовой гангрены (семейство, род, виды). Особенности морфологических и тинкториальных свой
Микобактерии и бордетеллы
Bordetella pertussis – возбудитель коклюша
Таксономическое положение возбудителя коклюша (семейство, род, вид). Морфологические и тинкториальные свойства B. pertuss
Патогенные спирохеты
Treponema pallidum – возбудитель сифилиса
Таксономическое положение возбудителя (семейство, род, вид). Строение и ультраструктура спирохет. Методы культивирования T
Риккетсии, Микоплазмы и хламидии
Mycoplasma pneumoniae – возбудитель острой пневмонии
Таксономическое положение M. pneumoniae. Морфологические и культуральные свойства микоплазм. Факторы патоге
Контрольные микропрепараты
1. Стафилококки в чистой культуре (окраска по Граму).
2. Стрептококки в чистой культуре (окраска по Граму).
3. Гонококки в гное (окраска по Граму).
4. Пневмококки в чисто
Контрольные макропрепараты
1. Чашка с желточно-солевым агаром и ростом золотистого стафилококка.
2. Чашка с кровяным агаром и ростом стафилококка.
3. Чашка с кровяным агаром и ростом пиогенного стрептококка
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Культивирование вируса в курином эмбрионе (возраст 10-12 дней). Тупой конец куриного яйца (над воздушным мешком) протирают слабым раствором йода, после чего в скорлупе делают отверстие острым зондо
Результаты РГА
Аллантоисная жидкость
Разведение вируссодержащего материала
Контроль эритроцитов
10-1
10-2
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель: Изучить возможность использования РТГА для определения подтипа вируса гриппа А.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
В однослойную культуру клеток вносят исследуемый материал. Покачивая, равномерно распределяют материал и помещают в термостат при температуре 37°С на 1,5 часа для адсорбции. На культуру клеток нано
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Вирус полиомиелита (диагностикум) смешивается с сывороткой обследуемого, взятой в разных разведениях, оставляется на один час при комнатной температуре и затем вносится в пробирки с культурой клето
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Вставить полоску мембраны (дипстик) вертикально в пробирку с разведенной пробой фекалий. Изъять дипстик из пробирки и уложить горизонтально. Результат учитывается через 5 минут по появлению зеленог
Справочный материал для оформления протоколов
Таблица
Серологические маркеры гепатита В
Форма, период болезни
HBsAg
Анти-HBs
HBeAg
Практическая работа
Р а б о т а №1
Цель:Освоить серологический метод диагностики вирусных энцефалитов.
Задача.
ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ
Введение. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии. Прогресс вирусологии во второй половине XX века, связанный с изучением структуры, биохимии и генет
Нейротропные вирусы
Вирус бешенства. Таксономическое положение. Свойства. Репродукция. Механизм передачи. Патогенез бешенства. Лабораторная диагностика. Биопрепараты для специфической профила
Гепатотропные вирусы
Возбудитель вирусного гепатита А. Таксономическое положение. Морфология. Свойства. Источник и пути передачи. Патогенез гепатита А. Особенности иммунитета. Принципы лаборат
Респираторные вирусы
Этиологическая структура вирусных инфекций с воздушно-капельным путем передачи.
Вирусы гриппа. Таксономическое положение. Морфология. Свойства вирусов гриппа А, В
Ретровирусы, Онкогенные вирусы, прионы
Медленные инфекции: определение понятия, общая характеристика возбудителей. Роль в патологии человека.
Вирусы иммунодефицита человека (ВИЧ).
На сепсис или бактериемию
Кровь для микробиологического исследования берут до начала специфического антибактериального лечения или, по крайней мере, через 12-24 ч после последнего введения препарата больному. Для полноценно
Бактериологическое исследование грудного молока
Перед сцеживанием молока тщательно обрабатывают соски и околососковую область молочных желез 70%-ным этанолом. Молоко из каждой молочной железы исследуется отдельно. Первые порции сцеженного молока
Бактериологическое исследование мочи
При заборе мочи на бактериологическое исследование нужно помнить, что если инфекция локализуется в почках, микроорганизмы содержатся во всех порциях мочи, а при инфекции мочевого пузыря моча остает
Бактериологическое исследование желчи
Желчь собирают при помощи дуоденального зонда в процедурном кабинете отдельно по порциям А, В и С в три стерильные пробирки, либо во время операции с помощью шприца в одну пробирку, соблюдая правил
Бактериологическое исследование отделяемого дыхательных путей
Для исследования используют отделяемое зева и носа; мокрота; содержимое бронхов, экссудаты; резецированные ткани и др. Материал собирают с соблюдением правил асептики в предварительно простерилизов
Бактериологическое исследование раневого отделяемого
При взятии материала из раны стерильным ватным тампоном кожу вокруг раны предварительно обрабатывают спиртом или другим антисептиком, некротические массы, детрит и гной удаляют стерильной салфеткой
Женских половых органов
Исследуемый материал, взятый тампоном, засевают в соответсвии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на половину чашки Петри с кровяным агаром, среду Эндо и затем производят посев тампоном в сахарн
Обязательная
1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2005. – 736 с.
2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микр
При составлении методического пособия была использована
следующая литература:
1. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии» /Под редакцией академика РАМН О.В. Бу
Новости и инфо для студентов