МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ

 

 

МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ

Практикум

Ч.2 Возбудители бактериальных

И грибковых инфекций

Биология вирусов.

Возбудители вирусных инфекций

Ханты-Мансийская государственная медицинская академия

Ханты-Мансийск

Департамент образования и науки

Ханты-мансийского автономного округа-югры

ГБОУ ВПО ХМАО-ЮГРЫ

Ханты-Мансийская государственная

Медицинская академия

_________________________________________________

Кафедра биологии с курсом микробиологии

МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ

Практикум

Ч.2 Возбудители бактериальных

И грибковых инфекций

Биология вирусов

Возбудители вирусных инфекций

 

Ханты-Мансийск

Информационно-издательский центр ХМГМА

ББК 52.64 + 51.1 (2) + 57.3    

Содержание

	Стр.
ВВЕДЕНИЕ.................................................................................................................................
Тематический план практических занятий.............................................
Схема описания биологических свойств возбудителя..................
Занятие №1. СТАФИЛОКОККИ. СТРЕПТОКОККИ. Микробиологическая диагностика стафило- и стрептококковых инфекций......................................................
Занятие №2. НЕЙССЕРИИ. ПНЕВМОКОККИ. Микробиологическая диагностика гонореи, менингококкового менингита и пневмококковой инфекции..
Занятие №3. ГЕМОФИЛЫ. БОРДЕТЕЛЛЫ. ЛЕГИОНЕЛЛЫ. Микробиологическая диагностика гемофильных инфекций легионеллеза и коклюша................................................................................................................................
Занятие №4. МИКОБАКТЕРИИ. коринебактерии. АКТИНОМИЦЕТЫ. Микробиологическая диагностика туберкулеза, дифтерии и актиномикоза..............
Занятие №5.эшерихии. шигеллы. Микробиологическая диагностика колиэнтеритов и шигеллезов..................................................................................................
Занятие №6. сальмонеллы. ИЕРСИНИИ. Микробиологическая диагностика брюшного тифа, паратифов А и В, сальмонеллезных гастроэнтеритов, кишечного иерсиниоза и псведотуберкулеза.......................................................................
Занятие №7. вибрионы. кампилобактерии. Микробиологическая диагностика вибриозов, кампилобактериозов и хеликобактериоза..............................
Занятие №8. ПРОТЕИ. КЛЕБСИЕЛЛЫ. ПСЕВДОМОНАДЫ. АЦинетобактеры. кандиды. Микробиологическая диагностика оппортунистических и госпитальных инфекций..............................................................
Занятие №9. зоонозы. Микробиологическая диагностика зоонозных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва, бруцеллез)...............................................
Занятие №10. Клостридии. Бактероиды. Микробиологическая диагностика анаэробных инфекций......................................................................................
Занятие №11. Спирохеты. Микробиологическая диагностика спирохетозов...
Занятие №12. РИККЕТСИИ. микоплазмы. хламидии. Микробиологическая диагностика риккетсиозов, микоплазмозов и хламидиозов....
Занятие №13. Контрольное занятие №1. Возбудители бактериальных и грибковых инфекций................................................................................................................
Занятие №14. БИОЛОГИЯ ВИРУСОВ. Методы диагностики вирусных инфекций. Противовирусный иммунитет. Стратегии противовирусной терапии.....
Занятие №15. ОРТОМИКСОВИРУСЫ. ПАРАМИКСОВИРУСЫ. КОРОНАВИРУСЫ. АДЕНОВИРУСЫ. ГЕРПЕСВИРУСЫ. Микробиологическая диагностика респираторных вирусных и герпесвирусных инфекций...........................
Занятие №16. Пикорнавирусы. Реовирусы. вирусы гепатита А, в, D, с, G. папилломавирусы. Микробиологическая диагностика риновирусных, энтеровирусных, ротавирусных инфекций и парентеральных гепатитов..................................................................................................
Занятие №17. АРБОВИРУСЫ. РАБДОВИРУСЫ. Ретровирусы. поксвирусы. Прионы. Микробиологическая диагностика особо опасных вирусных инфекций.......................................................................................
Занятие №18. Контрольное занятие №2. Биология вирусов. Возбудители вирусных инфекций.........................................................................................
ПРИЛОЖЕНИЕ.........................................................................................................................
Библиографический список.................................................................................

Введение

 

Уважаемые студенты!

Это введение Вам следует прочитать перед началом первого занятия.

Микробиология занимает особое положение среди всех дисциплин медицинского ВУЗа. С одной стороны она вооружает будущего врача знаниями, обеспечивающими решение задач по профилактике и лечению инфекционных заболеваний, с другой стороны знания биологии и экологии патогенных микроорганизмов способствует приобретению фундаментальных знаний необходимых для понимания клинических дисциплин, которые затрагивают вопросы взаимодействия микро- и макроорганизма.

Составляя этот практикум, мы имели желание помочь Вам сориентироваться в большом объеме и содержании учебного материала, который необходимо усвоить за два учебных семестра. Выполняя задания практикума и самостоятельно готовясь к практическим занятиям Вы увидите, как вопросы, изучаемые в микробиологии и вирусологии пересекаются и дополняют Ваши знания по нормальной и патологической физиологии, биохимии, фармакологии и другим дисциплинам медико-биологического и клинического цикла. В практикуме Вы найдете тематический план и подробное описание практических занятий.

Все виды учебной деятельности по микробиологии стандартно разделены на лекции, практические занятия и самостоятельную работу во внеучебное время.

Лекции проводятся еженедельно для всего потока студентов, основная цель дать мотивацию темы, вызвать интерес и настроить Вас на необходимость знания основных учебных элементов темы.

По каждому разделу курса предусмотрено определенное количество практических занятий. Выполняя задания практикума, Вы освоите практические навыки работы с микроорганизмами, проведения тех аналитических работ, которые распространены в бактериологических лабораториях. Кроме того, Вы научитесь делать выводы по результатам микробиологических исследований. Выполнение практической работы должно проводиться с соблюдением правил работы в микробиологической лаборатории, с которыми Вы познакомитесь на первом занятии. Помните, работа микробиологической лаборатории сопряжена с реальной опасностью (инфицирование, ожоги химическими веществами, поражения глаз, отравления и т.п.). Расписавшись в журнале прохождения инструктажа, Вы определенную часть ответственности за несчастный случай берете на себя, снимая ее с преподавателя.

Практические занятия также как и лекции будут еженедельными и строятся по единому принципу: 40-60 мин семинар по теме занятия и 110-90 мин выполнение заданий практикума. На семинарской части занятия в форме собеседования обсуждаются наиболее важные вопросы по теме занятия, кроме того, можно задать преподавателю интересующие Вас вопросы. В ходе семинара преподаватель поможет Вам лучше понять наиболее сложные разделы и, если необходимо, сообщит дополнительную информацию по изучаемой теме. При подготовке к практическому занятию необходимо внимательно изучить все Вопросы и задания для подготовки, используя литературу из списка рекомендуемой. Конспекты лекций помогут Вам оптимизировать самостоятельную работу при подготовке.

В течение 2-х семестров изучения микробиологии Вам необходимо вести тетрадь для практических занятий. Каждое практическое занятие оформляется в виде протоколов и сдается на практическом занятии ведущему преподавателю. Обращаем Ваше внимание, что задания для подготовки также необходимо выполнять письменно в тетради для практических занятий. В протоколы необходимо зарисовывать все препараты, поэтому при себе всегда нужно иметь набор цветных карандашей и линейку.

Допуск до практических занятий осуществляется при наличии сменной обуви, белого халата, колпака, оформленных в тетради заданий для подготовки и заготовок протоколов выполнения заданий практикума по теме текущего занятия. Кроме того, необходимо иметь отдельную тетрадь для ведения записей на семинарской части занятия.

Пропущенные занятия отрабатываются в соответствии с установленным кафедрой графиком отработок. Обращаем ваше внимание, что по каждому циклу дисциплины предусмотрено всего 2 отработки.

По каждому разделу курса предусмотрены контрольные знания в форме письменной контрольной работы и собеседования с преподавателем по контрольным микро- и макропрепаратам.

Зачет в конце весеннего семестра выставляется при условии посещения и выполнения всех практических занятий, а также сданных на положительную оценку контрольных занятий.

 

Желаем успехов в изучении одной из самых интересных дисциплин в медицинском ВУЗе – микробиологии и вирусологии!

 

 

Преподаватели

кафедры биологии с курсом микробиологии

Тематический План практических занятий

 

Схема описания биологических свойств микроорганизма

Уважаемые студенты!

При описании биологических свойств возбудителя используйте приведенную ниже схему, это позволит Вам избежать запоминания избыточной и порой бесполезной информации:

 

Возбудители бактериальных и грибковых инфекционных болезней

а) Семейство, род вид (по латыни). б) Серотипы, если антигенная структура важна для эпидемиологии, клиники и…  

Возбудители вирусных инфекционных болезней

1. Систематическое положение а) Семейство, род вид (по латыни). б) Серотипы, если антигенная структура важна для эпидемиологии, клиники и идентификации возбудителя (указывать только…

Образец экзаменационного билета

ГБОУ ВПО ХМАО-ЮГРЫ Ханты-Мансийская государственная медицинская АКАДЕМИЯ ----------- Основные термины и понятия (10 баллов) Дайте определение каждому…

Индивидуальная карта студента, допущенного для выполнения экзаменационной работы по дисциплине

Микробиология, вирусология

 

ФИО ____________________ Группа ______ __ курс Дата экзамена __________ 20__ г

 

Вид учебной деятельности	Примечание ведущего преподавателя	Дополнительные призовые баллы (решение экзаменационной комиссии)
ЛК	ПЗ	КЗ	Работа в СНК кафедры
Пропущено	Отработано	Ведение альбома (уд./хор./отл.)	Средний балл за 4 КЗ (уд./хор./отл.)

КЗ – контрольные занятия; ЛК – лекции;

ПЗ – практические занятия; СНК – студенческий научный кружок.

 

Результаты экзамена

S баллов за задание экзаменационной работы	S баллов за экзамен	Оценка за экзамен
№1	№2	№3	№4	№5	№6	№7

 

Нормировка рейтинга к стандартной оценке

  Актуальность занятия Стафилококковая и стрептококковая инфекция относятся к числу наиболее распространенных заболеваний бактериальной…

Вопросы для подготовки

1. Стафилококки. Систематика и биологические свойства, отдельные представители рода их роль в нормальной микрофлоре и патологии человека.

2. Факторы патогенности S. aureus и коагулазоотрицательных стафилококков (КОС) их роль в патогенезе стафилококковых инфекций.

3. Лекарственная устойчивость стафилококков, ее генетическое детерминирование. Метициллинрезистентные стафилококки и их роль в патологии человека.

4. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций.

5. Специфическая и неспецифическая терапия и профилактика стафилококковых инфекций.

6. Стрептококки. Систематика и биологические свойства, отдельные представители рода их роль в нормальной микрофлоре и патологии человека. Классификация стрептококков по Ленсфилд.

7. Факторы патогенности S. pyogenes A и их роль в патогенезе стрептококковых инфекций.

8. Значение стрептококка в этиологии скарлатины, ревматизма и гломерулонефрита, особенности патогенеза, иммунитета и методы диагностики.

9. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций.

10. Специфическая и неспецифическая терапия и профилактика стрептококковых инфекций.

 

ЗАДАНИЯ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ

1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур S. aureus и S. pyogenes. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

2. Решить задачу.

У больного А. в различных участках кожи возникли множественные очаги гнойного характера. Врач клинически поставил диагноз: «Фурункулез» и направил больного на обследование. Было проведено бактериоскопическое, бактериологическое и серологическое исследование для выяснения этиологии заболевания. Дайте диагностическую оценку результатам исследования, заполнив таблицу.

 

Метод исследования	Диагностическая ценность
Бактериоскопический
Бактериологический
Серологический

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель:Освоить бактериологический метод диагностики стафилококковых инфекций.

Задача. Больная М., 25 лет. Клинический диагноз: «Лактационный мастит». По готовым демонстрациям описать ход исследования грудного молока по дням с учетом количества возбудителя. Оформить протокол. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования и техника посева	Результат	Вывод (указать количество возбудителя КОЕ/мл)
Рис.	Описание роста
	КА
ЖСА
Эндо

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвердился ли клинический диагноз?…  

Й день исследования

  3, 4-й день исследования   Описание роста чистой культуры на Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски) …

Сероидентификации в реакции преципитации по Ленсфильд

Заключение:(Из исследуемого материала выделен _______________ (род и вид) серогруппы ____________)   Р а б о т а №3

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица 1

Видовая идентификация стафилококков

Таблица 2

Дифференциация стрептококков и энтерококков

  занятие №2: НЕЙССЕРИИ. ПНЕВМОКОККИ Микробиологическая диагностика гонореи, менингококкового менингита и пневмококковой…   Актуальность занятия

Вопросы для подготовки

1. Общая характеристика возбудителей менингитов и пневмоний, экология и эпидемиология.

2. Пневмококк. Таксономия и биологические свойства и экология возбудителя.

3. Факторы патогенности пневмококка, их роль в патогенезе пневмококковой пневмонии.

4. Микробиологическая диагностика пневмококковой пневмонии.

5. Специфическая и неспецифическая профилактика и терапия пневмококковой инфекции.

6. Нейссерии. Таксономия, биологические свойства, антигенная структура менингококков и гонококков. Отличия от непатогенных нейссерий.

7. Факторы патогенности менингококка и гонококка. Патогенез менингококковой инфекции у взрослых и детей (через факторы патогенности).

8. Эпидемиология менингококковой инфекции. Менингококконосительство.

9. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции, особенности бактериологического исследования спинномозговой жидкости при менингитах. Специфическая и неспецифическая профилактика и лечение.

10. Гонорея и бленнорея новорожденных, особенности патогенеза (через факторы патогенности). Механизм перехода острой гонореи в хроническую. Антигенная вариабельность гонококка.

11. Микробиологическая диагностика острой и хронической гонореи. Специфическая и неспецифическая профилактика и лечение.

 

ЗАДАНИЯ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ

  2. Заполнить таблицу «Сравнительная характеристика некоторых возбудителей…  

Практическая работа

Цель: Освоить микробиологическую диагностику менингококкового менингита.   Задача. Больной К., 24 года, в анамнезе сильные головные боли, боль в глазных яблоках, рвота не связанная с приемом…

Микроскопия исследуемого материала

Исследуемый материал	Метод диагностики	Рис. (способ окраски, обозначения)

 

Вывод:

РСК

Исследуемый материал	Ингредиенты реакции	Результат
		Опыт	Ксыв.	КAg

 

Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Какие методы и принципы диагностики использовали? 2. Что такое провокация? Можно ли ее использовать в данном случае? 3. Зачем поставили РСК? 4. Подтвердился ли клинический диагноз? Почему? 5. Почему лечение антибиотиками не дало эффекта?)

 

Р а б о т а №4

Цель: Изучить иммунобиологические препараты для специфической профилактики, терапии и диагностики гонореи, менингококковой и пневмококковой инфекций.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Схема описания иммунобиологических препаратов:

Название (Н):

Классификационное положение (КП):

Состав (С):

Получение (П):

Применение (Пр):

Способ применения (СП):

 

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица 1 Дифференцированные свойства некоторых видов рода Neisseria Вид … «+» – 90% и более штаммов положительные;

Вопросы для подготовки

1. Гемофилы. Таксономия, биологические свойства, антигенная структура. Экология и роль гемофилов в патологии человека.

2. Факторы патогенности гемофилов, их роль в патогенезе гемофильных инфекций. Специфическая и неспецифическая профилактика и терапия.

3. Микробиологическая диагностика гемофильных инфекций.

4. Возбудители коклюша и параколюша. Таксономия и биологические свойства. Антигенная структура.

5. Токсические субстанции возбудителя коклюша. Патогенез коклюша через факторы патогенности возбудителя. Специфическая и неспецифическая профилактика и терапия.

6. Микробиологическая диагностика коклюша и паракоклюша.

7. Легионеллы. Таксономия и биологические свойства.

8. Факторы патогенности легионелл (особенно антифагоцитарные факторы). Экология, роль биопленок в эпидемиологии легионеллеза. Особенности микробиологической диагностики легионеллезов.

 

Задания для подготовки

Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Haemophilus influenzaе, Legionella pneumophila и Bordetella pertussis. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Освоить бактериологический метод диагностики гемофильной инфекции.

 

Задача. В инфекционное отделение детской городской больницы поступил мальчик 4 лет. Врач при осмотре больного отметил, что ребенок без сознания, температура 38,9°С, пульс 120 ударов в минуту. Врач поставил диагноз: «Менингит». В отделении была сделана спинномозговая пункция, при пункции ликвор вытекал под давлением, был мутный. Используя готовые демонстрации описать ход исследования СМЖ по дням. Оформить протокол. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Микроскопия исследуемого материала (рис., способ окраски)	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
		«Шоколадный агар»

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвердился ли клинический диагноз?…  

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Для определения количества легионелл в исследуемой пробе необходимо подсчитать число колоний, выросших на агаре БУДРАГ. Для расчета использовать… Х = а×b/c ×1/s, где X – количество легионелл на литр в исследуемой пробе, КОЕ/л;

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица 1 Дифференцированные свойства некоторых видов рода Neisseria Вид … «+» – 90% и более штаммов положительные;

Вопросы для подготовки

1. Классификация микобактерий (сем. Mycobacteriaceae), систематика. Строение клеточной стенки. Окраска по Цилю-Нильсену, ингредиенты и механизм.

2. Возбудители туберкулеза, таксономия и биологические свойства.

3. Факторы патогенности возбудителей туберкулеза, их роль в патогенезе. Особенности взаимодействия микобактерий с макрофагами, формирование туберкулезных гранулем. Стадии развития туберкулезной инфекции.

4. Эпидемиология и особенности иммунитета при туберкулезной инфекции.

5. Микробиологическая диагностика туберкулеза. Экспресс-методы диагностики туберкулеза: иммуноферментный и иммунофлюоресцентный анализ.

6. Бактерии рода Corynebacterium, классификация. Дифтероиды, биологические свойства и роль в патологии человека.

7. Возбудитель дифтерии, биологические свойства, биовары.

8. Факторы патогенности: адгезии и колонизации, вирулентности, агрессии и защиты. Дифтерийный гистотоксин, строение и механизм действия. Патогенез дифтерии через факторы патогенности возбудителя.

9. Эпидемиология дифтерии. Современная эпидемиологическая ситуация по дифтерии в ХМАО-Югре и г. Ханты-Мансийске. Терапия и профилактика дифтерии.

10. Особенности иммунитета при дифтерии. Оценка напряженности антитоксического иммунитета (РНГА и реакция Шика).

11. Микробиологическая диагностика дифтерии и дифтерийного носительства. Определение токсигенности. Особенности дифференциальной диагностики дифтерийной палочки и дифтероидов.

12 Актиномицеты. Таксономия и биологические свойства. Факторы патогенности, роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика.

 

ЗАДАНИЯ для подготовки

  2. Решить задачу. В семье заболела дочь-студентка, предполагаемый диагноз: «Туберкулез легких». Проведено лабораторное обследование на…

Практическая работа

Цель:Освоить бактериологический метод диагностики туберкулеза. Задача. Больные Б. 67 лет и Г. 55 лет, клинический диагноз «Туберкулез…  

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

  ПРОТОКОЛ Цель:

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Микроскопия исследуемого материла (рис., способ окраски)	Среда для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
		Клауберга

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвердился ли клинический диагноз…  

Справочный материал для оформления протоколов

 

Таблица

Дифференциация коринебактерий

  занятие №5: эшерихии. шигеллы Микробиологическая диагностика колиэнтеритов и шигеллезов   УЧЕБНАЯ…   Актуальность занятия

Вопросы для подготовки

1. Семейство Enterobacteriaceae, общая характеристика, роль в патологии человека. Отдельные представители.

2. Банальная кишечная палочка как представитель нормальной микробиоты кишечника и условно-патогенный микроорганизм.

3. Классификация диареегенных эшерихий – возбудителей ОКИ на 5 групп (ЭТКП, ЭПКП, ЭИКП, ЭГКП и ЭАКП): факторы патогенности, механизм взаимодействия со слизистой кишечника. Эпидемиология и патогенез колиинфекций.

4. Состав и применение дифференциально-диагностических питательных сред (Левина, Эндо, Плоскирева).

5. Микробиологическая диагностика колиинфекции. Дифференциация энтеропатогенных E. coli от условно-патогенных штаммов. Пути определения источников инфекции.

6. Шигеллы, общая характеристика. Антигенная структура шигелл и ее отражение в международной классификации.

7. Факторы патогенности шигелл, механизм взаимодействия со слизистой кишечника. Эпидемиология и патогенез дизентерии.

8. Микробиологическая диагностика острой и хронической дизентерии. Колицинотипирование, его роль в установления эпидемической цепи.

 

Задания для подготовки

1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Escherichia coli и Shigella dysenteriae. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

2. Решить задачу.

В инфекционную больницу поступил ребенок из ясельного отделения детского сада с клиническими проявлениями острой кишечной инфекции: частый жидкий слизистый стул, высокая температура. Предположительный диагноз – «колиинфекция?». Проведено бактериологическое исследование. Обнаружена грамотрицательная палочка, которая идентифицирована как Е. соli.

Необходимо ответить на вопросы:

1. Каким образом доказать, что данная кишечная палочка явилась возбудителем заболевания?

2. Какие препараты рекомендуется назначить пациенту для коррекции микрофлоры?

3. Какие исследования необходимо провести для поиска источника инфекции?

 

3. Схематично нарисовать в тетради схему взаимодействия ЭПКП и шигелл со слизистой кишечника.

 

Практическая работа

Задание. Используя аннотации к питательным средам, внести в протокол описание сред, применяемых для диагностики кишечных инфекций.   ПРОТОКОЛ

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования	Результат	Реакция агглютинации с ОКА сывороткой
Рис.	описание роста	живая культура	гретая культура
	1. Эндо
2. Левина
3. Плоскирева
4. ВСА

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвержден ли диагноз эшерихиоза?…  

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
	1. Эндо
2. Левина
3. Плоскирева
4. ВСА

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Вывод:  

Серологическая диагностика острой дизентерии

«+» – наличие гемагглютинации; «–» – отсутствие гемагглютинации   Вывод:

Справочный материал для оформления протоколов

 

Таблица

Биохимические свойства эшерихий и шигелл

Род и вид	глюкоза	лактоза	индол	сероводород
Escherichia coli	кг	кг	+	–
Shigella spp.	кг	–	–	–

 

Схема определения антигенной структуры эшерихий

Ставят реакцию агглютинации на стекле и развернутую

а) с ОКА сывороткой (убедиться в повторяемости результата 2 дня исследования);

б) с ОКВ сывороткой, в которой антитела к 4 серогруппам (О20:К84, О26:К56, О55:К59, О111:К58);

в) с ОКЕ сывороткой, в которой антитела к 5 серогруппам (О124:К72, О142:К86, О143:К86, О144:К, О151:К);

г) с групповыми ОК-иммуноглобулинами в пределах тех серогрупп, которые были обнаружены при агглютинации в пунктах «б» и «в».

Определение серовара диареегенных эшерихий проводится в реакции иммобилизации по характеру роста в полужидком агаре с Н-сыворотками.

Для постановки теста чистую культуру исследуемого микроба сеют уколом в столбик МПА, посев выращивают при 37°С, в течение 18-24 ч.

Иммобилизация – рост культуры по ходу укола при наличии соответствия сыворотки и жгутикового антигена культуры, отсутствие иммобилизации – рост культуры по всему столбику (диффузно).

занятие №6:	сальмонеллы. ИЕРСИНИИ Микробиологическая диагностика брюшного тифа, паратифов А и В, сальмонеллезных гастроэнтеритов, кишечного иерсиниоза и псведотуберкулеза
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ:	1. Изучить биологические свойства сальмонелл и иерсиний. 2. Овладеть умением оценки результатов микробиологической диагностики брюшного тифа, паратифов А и В, сальмонеллезных гастроэнтеритов, кишечного иерсиниоза и псведотуберкулеза. 3. Научиться решать практические задачи по специфической профилактике и терапии сальмонеллезов и иерсиниозов.

 

Актуальность занятия

В инфекционной патологии кишечных инфекций остаются серьезные проблемы, связанные с продолжающимся распространением, нарастающей летальностью, проблемами ранней профилактики и адекватного лечения сальмонеллезных инфекций. Широкая встречаемость данной патологии обусловлена появлением антибиотикорезистентных штаммов сальмонелл среди животных по причине применения антибактериальных средств в животноводстве, птицеводстве, рыбоводстве, а также с распространением вторичных иммунодефицитов среди населения. По-прежнему регистрируются и тифозная группа сальмонеллезов, включая брюшной тиф и паратифы.

Знание патогенеза сальмонеллезов, брюшных тифов А и В необходимо для правильного выбора метода диагностики и выявления состояний бактерионосительства, которое часто встречается в данной группе инфекций.

 

Вопросы для подготовки

1. Бактерии рода Salmonella, таксономия, общая характеристика рода. Факторы патогенности сальмонелл брюшного тифа и паратифов А и В.

2. Антигенная структура сальмонелл по Кауфману-Уайту. Таксономический кризис сальмонелл.

3. Эпидемиология и патогенез брюшного тифа и паратифов А и В (через факторы патогенности). Механизм взаимодействия сальмонелл со слизистой кишечника.

4. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов А и В. Реакция Видаля, ее механизм и виды (анамнестическая, инфекционная и прививочная).

5. Бактерионосительство при брюшном тифе, причины и диагностика (бактериологический и серологический методы). Особенности иммунитета.

6. Сальмонеллезы – пищевые токсикоинфекции, общая характеристика возбудителей и факторов агрессии, особенности патогенеза. Эпидемиология.

7. Микробиологическая диагностика сальмонеллезных токсикоинфекций.

8. Бактерии рода Yersinia, таксономия, общая характеристика рода. Факторы патогенности иерсиний энтероколитика и псевдотуберкулеза.

9. Механизм взаимодействия иерсиний со слизистой кишечника. Патогенез кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза.

10. Экология иерсиний и микробиологическая диагностика, вызываемых заболеваний.

11. Препараты, применяемые для терапии, профилактики и диагностики брюшного тифа, паратифов А и В, сальмонеллезных токсикоинфекций и иерсиниозов.

 

Задания для подготовки

1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Salmonella typhi и Yersinia enterocolitica. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

2. Решить задачу.

В инфекционную больницу поступил пациент К., 23 лет с высокой температурой 39,5°С. Температура сохранялась в течение трех дней. Возникло подозрение на брюшной тиф.

Необходимо ответить на вопросы:

1. Как подтвердить диагноз?

2. Какой взять основной исследуемый материал?

3. Какой метод диагностики применить, и по какому свойству точно можно определить вид возбудителя?

 

3. Схематично нарисовать в альбоме схему взаимодействия сальмонелл и иерсиний со слизистой кишечника.

 

4. Заполнить таблицу «Бактериальные пищевые токсикоинфекции»:

 

Этиология	Часто встречающиеся возбудители	Редко встречающиеся возбудители
Основное звено патогенеза
Длительность инкубационного периода
Принципы лабораторной диагностики

 

5. Заполнить таблицу «Бактериальные пищевые токсикозы»:

 

Этиология
Основное звено патогенеза
Длительность инкубационного периода
Принципы лабораторной диагностики

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель:Освоить бактериологический метод диагностики брюшного тифа.

 

Задача.Больной К., 32 года, 6 дней назад появилась слабость, резкая головная боль, температура все дни 40°С. У больного отмечается бред, иногда приступы возбуждения. Предварительный диагноз: «Брюшной тиф?». Для подтверждения диагноза в бактериологическую лабораторию направлена кровь больного для выделения гемокультуры. Провести бактериологическое исследование крови по дням, оформить протокол исследования, используя готовые демонстрации. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среда для посева	Условия культивирования	Результат	Пересев на среды
Рис.	описание роста	Эндо	ВСА
	Желчный бульон				рис., описание роста	рис., описание роста

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение:(Ответить на вопросы: 1. Подтвердился ли клинический диагноз?…  

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Критерием оценки результатов реакции при однократно взятой сыворотке является диагностический титр, равный у невакцинированных взрослых 1:200, а у…   ПРОТОКОЛ

Результаты реакции Видаля больного П.

 

Результаты реакции Видаля больного Т.

  Заключение:(Ответить на вопросы: 1. Какой характер имеет реакция Видаля у…  

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица 1

Схема антигенного строения сальмонелл Кауфмана-Уайта

Серогруппа	Серотип	О-антиген	Н-антиген
фаза1	фаза 2
А	S.paratyphi A S. schotmulleri (paratyphi В)	(1), 2, 12   (1), 4, 5), 12	а   b	1, 2   1, 2
B	S.typhimurium	(1), 4, (5), 12	i	1, 2
C-1	S.paratyphi C S.cholerae suis	Vi, 6, 7 6, 7	c c	1, 5 1, 5
D	S.typhi S.enteritidis	Vi, 9, 12 9, 12	d g, m	- -

 

Таблица 2

Биохимическая активность сальмонелл

Вид	Глюкоза	Лактоза	Индол	Сероводород
S.typhi	к	-	-	+
S.paratyphi A	кг	-	-	+
S.schotmulleri (paratyphi В)	кг	-	-	+
S.typhimurium	кг	-	-	+

 

Схема определения антигенной структуры сальмонелл

Ставят реакцию агглютинации на стекле

а) с комплексной сальмонеллезной сывороткой;

б) с групповыми монорецепторными О-сыворотками: О-2, О-4, О-9;

в) с монорецепторными типовыми Н-сыворотками: H-а, H-в, H-i.

 

 

занятие №7:	вибрионы. кампилобактерии Микробиологическая диагностика вибриозов, кампилобактериозов и хеликобактериоза
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ:	1. Изучить биологические свойства вибрионов и кампилобактерий. 2. Овладеть умением оценки результатов микробиологической диагностики вибриозов и кампилобактериозов. 3. Научиться решать практические задачи по профилактике и терапии холеры и кампилобактериозов.

 

Актуальность занятия

Холера остается важной эпидемиологической проблемой в связи с активной миграцией населения и завозом инфекции на территорию РФ из других стран. С 1961 года мир находится в состоянии седьмой пандемии холеры, которая вызвана особым биоваром холерного вибриона – Эль-Тор. Главным методом диагностики холеры является бактериологический, врач должен знать показания для исследования на холеру, правила забора и доставки материала.

Хеликобактер, также как и кишечная палочка является одним из самых распространенных инфекционных агентов человека: он присутствует в желудке около половины населения Земного шара, не принося вреда хозяину. Вне пределов своего естественного биотопа (антрального отдела желудка) вызывает деструктивный процесс, поддерживаемый другими факторами и способствующий развитию язвы желудка и 12-перстной кишки.

 

Вопросы для подготовки

1. Общая характеристика семейства Vibrionaceae. Классификация вибрионов. Роль парахолерных вибрионов в патологии человека.

2. Вибрионы холеры, систематика и биологические свойства. Дифференциация биоваров и сероваров.

3. Холероген, строение и механизм действия. Эпидемиология и патогенез холеры (через факторы патогенности). Особенности иммунитета.

4. Микробиологическая диагностика холеры: бактериологический метод и методы экспресс-диагностики.

5. Специфическая и неспецифическая профилактика и терапия холеры.

6. Хеликобактерии, систематика, биологические свойства. Роль в патологии человека –язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки, проктиты и др.

7. Патогенез хеликобактериоза (гипотетические схемы патогенеза, через факторы патогенности). Терапия и профилактика.

8. Лабораторная диагностика хеликобактериозов.

9. Кампилобактерии, систематика, биологические свойства и факторы патогенности. Патогенез и эпидемиология кампилобактериозов человека (пищевые отравления). Микробиологическая диагностика и лечение.

 

Задания для подготовки

1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Vibrio cholerae, Campylobacter coli и Helicobacter pylori. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

2. Решить задачу.

Произошла вспышка острого диарейного синдрома. Заболело несколько десятков человек. Возникло подозрение на холеру. Для предотвращения распространения заболевания необходимо срочно поставить диагноз и назначить профилактические мероприятия.

1. Перечислить методы экспрессной (ускоренной) диагностики холеры.

2. Какие неспецифические препараты необходимо назначить для экстренной профилактики контактных лиц?

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Освоить бактериологический метод диагностики холеры.

 

Задача. В детском морском лагере «Жемчужина» возникла вспышка острой кишечной инфекции, объективно у всех заболевших детей высокая температура, повторные рвоты и частый жидкий стул. Сотрудниками бактериологической лаборатории взяты пробы морской воды в зоне купания детского лагеря. С целью выделения холерного вибриона произведен посев 5 мл воды в 1%-ную пептонную воду, затем из нее на чашки Петри с щелочным агаром. Провести бактериологическое исследование воды по готовым демонстрациям и описать ход исследования по дням. Оформить протокол. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста	тест на оксидазу
	1%-ная пептонная вода
Щелочной агар

 

Вывод:

 

Й день исследования

 

Описание роста чистой культуры	Микроскопия чистой культуры (рис., способ окраски)	«Биохимический ряд» (триада Хейберга)
сахароза	арабиноза	манноза

 

Вывод:

 

Сероидентификация в реакции агглютинации с О-холерной сывороткой

И типовыми сыворотками Огава и Инаба

 

Сыворотка	Результат (+/-)	Разведения	Вывод
О-сыворотка		1:100	1:200	1:400	1:800	КАg	Ксыв.
Огава (АВ)
Инаба (АС)

 

Определение биовара холерного вибриона

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвержден ли диагноз холеры? 2. Дайте…  

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

  ПРОТОКОЛ Цель:

Справочный материал для оформления протоколов

 

Таблица 1

Сахаролитические свойства вибрионов на триаде Хейберга

Таблица 2 Дифференциация биоваров Vibrio choleraе Признак биовар…  

Вопросы для подготовки

1. Госпитальная инфекция, ее этиология, условия возникновения и пути заражения. Понятие «госпитальный штамм», пути формирования и маркеры госпитальных штаммов. Профилактика ВБИ в ЛПУ.

2. Условно-патогенные микроорганизмы, определение понятия и его относительность. Роль условно-патогенных микроорганизмов в неинфекционной клинике.

3. Банальная кишечная палочка – Escherichia coli, как условно-патогенный микроорганизм. Общая характеристика факторов патогенности и возможные заболевания.

4. Синегнойная палочка – Pseudomonas aeruginosa, как возбудитель тяжелой госпитальной инфекции. Систематика и биологические свойства. Факторы патогенности. Особенности эпидемиологии. Микробиологическая диагностика.

5. Бактерии рода Proteus. Общая характеристика, факторы патогенности, возможные заболевания и роль в патологии человека. Протеи как возбудители токсикоинфекций. Микробиологическая диагностика.

6. Бактерии рода Klebsiella. Общая характеристика, факторы патогенности, возможные заболевания и роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика.

7. Бактерии рода Acinetobacter. Общая характеристика, факторы патогенности, возможные заболевания и роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика.

8. Дрожжеподобные грибы рода Candida. Таксономия, биологические свойства. Факторы патогенности и роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика кандидозов.

9. Сепсис и бактериемия, определение понятий, причины и возбудители. Микробиологическое исследование крови, алгоритм, критерии оценки результатов (сепсис/бактериемия?).

10. Комплексное исследование на бактерии кишечной группы и условно-патогенные микроорганизмы. Алгоритмы.

11. Биопрепараты, используемые для диагностики, специфической терапии и профилактики оппортунистических инфекций, вызываемых грамотрицательными бактериями.

 

Задания для подготовки

Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumani. Окраска по Граму. Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Освоить бактериологический метод диагностики синегнойной инфекции и исследования гнойного отделяемого.

 

Задача. У пациента К., 55 лет с термическим ожогом 2-3 степени, с поражением 25% площади тела, на 7 сутки, несмотря на интенсивную терапию, на фоне гранулирующей ткани увеличилось количество гнойного отделяемого, имеющего зеленый цвет. В раневом отделяемом при микроскопии обнаружены грамотрицательные короткие и подвижные палочки. Этот же возбудитель был обнаружен в смывах с медицинского оборудования. По готовым демонстрациям провести бактериологическое исследование отделяемого раны больного К. Оформить протокол. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Микроскопия исследуемого материла (рис., способ окраски)	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
		1. КА
2. ЖСА

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопрос: 1. Какой возбудитель был выделен из…  

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования, способ посева	Результат	Степень бактериурии, КОЕ/мл
Рис.	описание роста
	КА

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Какой возбудитель был обнаружен в моче?…  

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования, способ посева	Результат	Пересев на КА
Рис.	описание роста	Результат
	Сахарный бульон				Рис.	описание роста

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение:(Ответить на вопросы: 1. Как интерпретировать полученные…  

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования, способ посева	Результат
Рис.	описание роста
	Агар Сабуро

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтвержден ли клинический диагноз?…  

Справочный материал для оформления протоколов

 

Таблица

Дифференциация некоторых условно-патогенных грамотрицательных бактерий

Интерпретация результатов исследования при кандидозе

– степень I – очень скудный рост (на плотных питательных средах роста нет, рост только в жидкой питательной среде); – степень II – небольшое количество – 1-10 колоний; – степень III – умеренное количество – 11-100 колоний;

Вопросы для подготовки

1. Понятие «Зоонозная инфекция», «Особо опасная инфекция», общая характеристика и очаги в РФ (особенно в ХМАО-Югре). Примеры. Правила работы с возбудителями особо опасных инфекций.

2. Возбудитель чумы, биологические свойства. Факторы патогенности патогенез. Микробиологическая диагностика.

3. Возбудитель сибирской язвы, таксономия и биологические свойства. Факторы патогенности. Природные резервуары вызываемой инфекции (на примере Тюменской области) и патогенез (клинические формы). Микробиологическая диагностика.

5. Возбудитель туляремии, таксономия и биологические свойства. Факторы патогенности и патогенез туляремии. Природные резервуары вызываемой инфекции (на примере Тюменской области) и патогенез (клинические формы). Микробиологическая диагностика.

6. Возбудитель бруцеллеза, сложности в систематике бруцелл. Факторы патогенности и биологические свойства. Патогенез бруцеллеза и особенности иммунитета. Микробиологическая диагностика.

7. Препараты, используемые для диагностики, профилактики и лечения зооантропонозов.

 

Задания для подготовки

1. Зарисовать из атласа микропрепараты чистых культур Bacillus anthracis, Brucella melitensis, Francisella tularensis (окраска по Граму) Yersinia pestis (окраска метиленовым синим). Указать морфологию и тинкториальные свойства.

 

2. Решить задачу.

В населенном пункте, неблагополучном по бруцеллезу у овец, в семье, состоящей из 4 человек, заболела дочь, студентка, приехавшая на зимние каникулы, острым заболеванием с высокой температурой; предполагаемый диагноз – «Бруцеллез?». Проведено лабораторное обследование на бруцеллез всех членов семьи, результаты представлены в таблице.

 

Обследуемые	Отец	Мать	Дочь	Сын	Какие методы диагностики использованы?
Вид исследований	Выделение гемокльтуры	–	–	+	+
Реакция Райта	–	1:100	–	1:400
Реакция Бюрне	+	+	–	+
Вопросы	Кто болен острой формой бруцеллеза?
У кого скрытая форма инфекции или бруцеллез в прошлом?
У кого бессимптомная форма болезни?

 

Практическая работа

Цель: Освоить серологический метод диагностики бруцеллеза (реакция Хадделсона и Райта).   Задача. Ветфельдшер обратился к врачу с жалобами на потливость, волнообразную лихорадку, головную боль, боли в мышцах…

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
	1. МПА
2. КА

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Подтверждается ли диагноз сибирской язвы?…  

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Ксыв. – не должно быть кольцепреципитации (отсутствие спонтанной преципитации сыворотки); КАg – не должно быть кольцепреципитации (отсутствие… В случае положительной реакции на границе между сывороткой и исследуемым…  

Вопросы для подготовки

1. Бактерии рода Clostridium, систематика и общая характеристика. Роль в этиологии анаэробной раневой инфекции. Отдельные представители.

2. Клостридии столбняка, биологические свойства, устойчивость во внешней среде спор, столбнячный экзотоксин (строение, особенности секреции, механизм действия) и другие факторы патогенности. Патогенез, диагностика, иммунитет, иммунопрофилактика (пассивная, активная, плановая, экстренная) и терапия столбняка.

3. Клостридии газовой гангрены, классификация. Биологические свойства, факторы патогенности на примере С. perfringens. Отличительные признаки С. perfringens, С. novyi, С. septicum, С. histolyticum. Патогенез, микробиологическая диагностика, иммунопрофилактика и серотерапия газовой гангрены.

4. Роль клостридий в пищевых инфекциях и интоксикациях. Clostridium difficile: среда обитания, общая характеристика патогенеза вызываемого заболевания.

5. Клостридии ботулизма, общая характеристика, серовары, ботулинический токсин (строение, особенности секреции, механизм действия), особенности патогенеза, диагностика (общая схема, выявление и типирование токсина, выделение чистой культуры, выявление антитоксических антител) и серотерапия ботулизма.

6. Бактероиды, превотеллы, порфиромонады, пептококки, пептострептококки, фузобактерии и вейлонеллы, как представители неклостридиальных неспорообразующих анаэробов – возбудителей гнойно-воспалительных и раневых инфекций. Систематика, биологические свойства.

7. Факторы патогенности неклостридиальных анаэробов на примере B. fragilis и F. necrophorum. Особенности патогенеза, вызываемых инфекций (через факторы патогенности). Клинические проявления неклостридиальной анаэробной инфекции.

8. Забор и доставка материала на микробиологическое исследование при подозрении на анаэробную инфекцию. Методы микробиологической диагностики. Терапия и профилактика.

 

ЗАДАНИЯ для подготовки

  2. Решить задачу. Пострадавшему в автомобильной катастрофе больному С. 45 лет, после оказания экстренной хирургической помощи было…

Практическая работа

Цель:Изучить особенности бактериологического метода диагностики ботулизма.   В инфекционную больницу поступил больной с подозрением на пищевой ботулизм. Для диагностики в целях обнаружения…

Й день исследования

 

Исследуемый материал	Микроскопия исследуемого материала (рис., способ окраски)	Среды для посева	Условия культивирования	Результат
Рис.	описание роста
		МПА
ЖСА
Эндо
Шедлер-агар с кровью

 

Вывод:

 

Й день исследования

  Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Назовите этиологический фактор…  

Вопросы для подготовки

1. Спирохеты. Основные таксоны спирохет, роль в патологии человека. Строение и передвижение спирохет.

2. Возбудитель сифилиса, таксономия, биологические свойства, факторы патогенности. Эпидемиология, патогенез, терапия и профилактика сифилиса.

3. Бактериоскопический и серологический метод диагностики сифилиса (реагиновые тесты, реакция Вассермана и осадочные реакции).

4. Лептоспиры, биологические свойства, факторы патогенности. Эпидемиология, патогенез, профилактика и терапия лептоспироза.

5. Лабораторная диагностика лептоспироза.

6. Боррелии, биологические свойства, факторы патогенности. Эпидемиология, патогенез боррелиозов, лабораторная диагностика, терапия и профилактика.

 

ЗАДАНИЯ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ

Заполнить таблицу «Возбудители спирохетозов»:

Инфекция	Возбудитель (лат.)	Морфологические отличия (рис.)	Источник инфекции (переносчики)	Методы диагностики
Сифилис
Лептоспироз
Болезнь Лайма

 

Практическая работа

Цель: Освоить серологический метод диагностики сифилиса (реакция Вассермана и РСК).   Задача. Для планового обследования на сифилис в серологическую лабораторию доставлены сыворотки от двух беременных…

Вопросы для подготовки

1. Риккетсии. Основные таксоны риккетсий. Классификация риккетсиозов по П.Ф. Здродовскому.

2. Биологические свойства риккетсий, особенности культивирования.

3. Эпидемиология, патогенез, профилактика и терапия основных риккетсиозов.

4. Лабораторная диагностика сыпных тифов, Ку-лихорадки и пятнистых лихорадок.

5. Микоплазмы, классификация, биологические свойства и факторы патогенности. Отдельные представители рода, их роль в патологии человека. Патогенез и методы диагностики урогенитального микоплазмоза.

6. Хламидии, классификация, биологические свойства и факторы патогенности. Цикл развития хламидий. Роль в патологии человека. Патогенез и методы диагностики урогенитального хламидиоза.

 

ЗАДАНИЯ для подготовки

  2. Заполнить таблицу «Возбудители риккетсиозов»: Риккетсиоз …  

Практическая работа

Цель: Освоить навык оценки результатов РСК в серологической диагностике сыпного тифа.   Задача. В клинику поступил больной с высокой температурой и пятнисто-петехиальной сыпью по всему телу. Болен 7-й день.…

Вопросы для подготовки

Энтеробактерии, вибрионы и кампилобактерии

Основные факторы патогенности энтеробактерий, их роль в развитии инфекционного процесса. Эндотоксин энтеробактерий (строение, вызываемые им… Источники инфекции при ОКИ, механизм заражения и пути распространения.  

Возбудители зоонозных инфекций

  Бруцеллы – возбудители бруцеллеза Таксономическое положение возбудителей бруцеллеза (семейство, род, вид). Биологические свойства бруцелл…

Возбудители оппортунистических и госпитальных инфекций

  Pseudomonas aeruginosa – возбудитель гнойно-септических инфекций человека Таксономическое положение синегнойной палочки (семейство, род, вид). Морфологические, тинкториальные, культуральные и…

Патогенные кокки

Таксономическое положение стафилококков (семейство, род, виды). Морфологические, тинкториальные и культуральные свойства стафилококков.…   Стрептококки – возбудители раневой, гнойно-воспалительной и септической инфекции

ПАТОГЕННЫЕ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ

Таксономическое положение возбудителей газовой гангрены (семейство, род, виды). Особенности морфологических и тинкториальных свойств клостридий –…   Clostridium tetani – возбудитель столбняка

Патогенные и условно-патогенные коринебактерии,

Микобактерии и бордетеллы

Таксономическое положение возбудителя коклюша (семейство, род, вид). Морфологические и тинкториальные свойства B. pertussis. Культуральные и…   Микобактерии – возбудители туберкулеза

Патогенные спирохеты

Таксономическое положение возбудителя (семейство, род, вид). Строение и ультраструктура спирохет. Методы культивирования T.pallidum. Тинкториальные…   Leptospira interrogans – возбудитель лептоспироза

Риккетсии, Микоплазмы и хламидии

Таксономическое положение M. pneumoniae. Морфологические и культуральные свойства микоплазм. Факторы патогенности M. pneumoniae (факторы адгезии и…   M. hominis и Ureaplasma urealiticum – возбудители урогенитального микоплазмоза

Контрольные микропрепараты

2. Стрептококки в чистой культуре (окраска по Граму). 3. Гонококки в гное (окраска по Граму). 4. Пневмококки в чистой культуре (окраска по Граму).

Контрольные макропрепараты

2. Чашка с кровяным агаром и ростом стафилококка. 3. Чашка с кровяным агаром и ростом пиогенного стрептококка. 4. Чашка с кровяным агаром и ростом пневмококка.

Вопросы для подготовки

1. Морфология, структура и химический состав вирусов.

2. Таксономия вирусов, современные критерии классификации. Таксономические категории: семейство, подсемейство, род, вид (тип).

3. Дефектные вирусы: дефектные интерферирующие частицы (ДИ), условно-дефектные вирусы, вирусы-сателлиты, псевдовирионы.

4. Типы взаимодействия вирусов с клеткой: продуктивный, абортивный и интегративный.

5. Репродукция РНК-геномных вирусов.

6. Репродукция ДНК-геномных вирусов.

7. Методы культивирования вирусов (в культуре ткани, курином эмбрионе и организме чувствительных животных).

8. Индикация вирусов при разных методах культивирования: в курином эмбрионе, в культуре ткани, в организме чувствительных лабораторных животных.

9. Реакции гемагглютинации и гемадсорбции вирусов, их механизмы.

10. Методы микробиологической диагностики вирусных инфекций: вирусоскопический, вирусологический, иммунологический. Генетические методы диагностики вирусных инфекций.

11. Противовирусный иммунитет, его особенности.

12. Принципы специфической профилактики и иммунотерапии вирусных инфекций.

13. Противовирусные химиотерапевтические препараты и индукторы интерферона, механизмы их противовирусного действия.

 

Задания для подготовки

Заполнить таблицу «Основные термины вирусологии»:

 

Термин	Определение
Вирион
Структурные белки
Неструктурные белки
Капсид
Капсомеры
Суперкапсид
Транскрипция
Трансляция
Репликация
Включения
Вирогения
Персистенция
Хроническая вирусная инфекция
Латентная вирусная инфекция
Медленная вирусная инфекция
Вироиды
Прионы

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель:Освоить вирусологический метод диагностики инфекционных заболеваний.

Задача. В инфекционной клинике находится больной с предварительным диагнозом: «Натуральная оспа?». Содержимым пустул больного проведено заражение куриного эмбриона. Провести вскрытие куриного эмбриона и исследовать его содержимое. Зарисовать строение куриного эмбриона. Обозначить на рисунке основные структурные элементы, указать стрелками возможные пути введения вируссодержащего материала. С помощью реакции гемагглютинации (РГА) определить титр вируса в аллантоисной жидкости. Зарисовать механизм реакции. Сделать заключение.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Протокол   Цель: Исследуемый материал Объект заражения Строение куриного эмбриона Состояние …

Результаты РГА

  Вывод:  

Вопросы для подготовки

1. Классификация и общая характеристика вирусов – возбудителей ОРВИ. Причины доминирования ОРВИ в инфекционной патологии человека.

2. Вирусы семейства Orthomyxoviridae. Морфология и свойства. Репродукция.

3. Антигенное строение вирусов гриппа. Изменчивость вирусов гриппа (шифт и дрейф). Происхождение вируса птичьего и свиного гриппа.

4. Методы микробиологической диагностики гриппа (вирусоскопический, вирусологический, серологический).

5. Вирусы семейства Paramyxoviridae. Морфология и свойства. Репродукция.

6. Эпидемический паротит, характеристика возбудителя, патогенез заболевания и методы диагностики.

7. Патогенез кори, методы микробиологической диагностики.

8. Вирусы семейства Adenoviridae. Морфология и свойства. Репродукция.

9. Патогенез аденовирусных инфекций, методы диагностики.

10. Вирусы семейства Coronaviridae. Таксономия и свойства. Особенности репродукции. Вирус атипичной пневмонии (SARS). Особенности патогенеза и методы диагностики.

11. Специфическая профилактика и терапия гриппа, кори, паротита: биопрепараты, их действующее начало, механизм действия.

12. Вирусы семейства Herpesviridae, систематика (патогенные для человека виды), морфология и репродукция.

13. Патогенез и эпидемиология герпесвирусной инфекции, методы микробиологической диагностики, специфическая профилактика герпетической инфекции.

 

Задания для подготовки

Зарисовать в альбом морфологию вириона орто-, парамиксовирусов, корона-, адено- и герпесвирусов. Обозначить на рисунках все структурные элементы.

 

Практическая работа

Р а б о т а №1 Цель: Изучить возможность использования РТГА для определения подтипа вируса…  

Схема постановки РСК

Ингредиенты	1 опыт	2 опыт	К сыв.	К вирусосод.мат.б-го С	К вируссод.мат.б-го М.
Аденовирусная сыворотка	0,25	0,25	0,25	–	–
Вируссод.мат.б-го С	0,25	–	—	0,25	-
Вируссод.мат.б-го М	–	0,25	–	-	0,25
Комплемент	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25
Физиологический р-р	–	–	0,25	0,25	0,25
Инкубация в термостате 30 минут
Гемолитическая система	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Результаты

 

Заключение: (Ответить на вопросы: 1. У кого из больных подтвердился клинический диагноз? Почему? 2. Какой антиген аденовирусов определили в РСК? 3. Можно ли определить тип вируса? 4. Закончено ли исследование?).

 

Р а б о т а №4

Цель: Изучить возможность использования ИФА для диагностики цитомегаловирусной инфекции.

 

Задача. У детей А., 1 мес. и Н., 7 мес. с подозрением на цитомегаловирусную инфекцию на исследование взята моча. С центрифугатом мочи поставлена ИФА. Учесть результаты ИФА, оформить протокол. Сделать заключение.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Исследуемый материал	Метод диагностики	Результат
		Рис. с обозначениями

 

Заключение: (Ответить на вопросы: 1. Какой применен метод и принцип диагностики? 2. Что определяли в центрифугате мочи? 3. Какие ингредиенты использовались для постановки ИФА. 4. Можно ли на основании полученных результатов подтвердить диагноз? Почему?).

 

Р а б о т а №5

Цель: Изучить иммунобиологические препараты для специфической профилактики, терапии и диагностики респираторных вирусных инфекций.

 

ПРОТОКОЛ

Цель:

 

Схема описания иммунобиологических препаратов:

Название (Н):

Классификационное положение (КП):

Состав (С):

Получение (П):

Применение (Пр):

Способ применения (СП):

 

 

занятие №16:	Пикорнавирусы. Реовирусы. вирусы гепатита А, в, D, с, G. папилломавирусы Микробиологическая диагностика риновирусных, энтеровирусных, ротавирусных инфекций и парентеральных гепатитов
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ:	1. Изучить биологические свойства пикорно-, рео-, папилломавирусов и вирусов гепатита А,В,С,D и G. 2. Овладеть умением оценки результатов микробиологической диагностики риновирусных, энтеровирусных, ротавирусных инфекций и парентеральных гепатитов. 3. Научиться решать практические задачи по профилактике и терапии энтеровирусных, ротавирусных инфекций и парентеральных гепатитов.

Актуальность занятия

Пикорнавирусы, являющиеся возбудителями обширной группы вирусных инфекций, включают в себя возбудителей полиомиелита, энтеровирусных заболеваний (вирусы Коксаки и Экхо, гепатита А) и риновирусных инфекций. Эти вирусы вызывают разнообразные поражения человеческого организма, а полиомиелит является калечащей инфекцией. Необходимость изучения этих инфекций диктуется их значительным удельным весом в структуре инфекционной патологии, а также тем, что вопросы их диагностики и особенно профилактики являются важным звеном здравоохранения.

В настоящее время наблюдается рост заболеваемости парентеральными гепатитами в России. Вирус гепатита В устойчив во внешней среде, для инфицирования человека достаточно нескольких вирусных частиц, вирус легко проникает через кожу и слизистые (наличие микротравм), для заражения опасны даже следы крови на медицинском халате, предметах обихода (расчески, маникюрные наборы, полотенца и т.д.). По степени эпидемиологической опасности гепатит В опережает ВИЧ-инфекцию. Врач должен хорошо знать причины, условия развития и распространения парентеральных гепатитов, понимать, что для лечения этих заболеваний необходима своевременная диагностика, владеть эффективными методами специфической терапии и профилактики.

 

Вопросы для подготовки

1. Таксономия и общая характеристика семейства Picornaviridae, распространение в природе.

2. Энтеровирусы (полиовирусы, Коксаки, ЕСНО), морфология и репродукция.

3. Клинические проявления энтеровирусных инфекций (полиовирусы, Коксаки, ЕСНО). Особенности патогенеза и пути инфицирования человека. Методы лабораторной диагностики – вирусологические и иммунологические. Диагностические биопрепараты.

4. Специфическая профилактика и терапия полиомиелита: биопрепараты, их состав, механизм действия. Контроль эффективности вакцинации.

5. Вирус гепатита А, морфология и репродукция. Особенности патогенеза. Методы диагностики и специфической профилактики.

6. Риновирусы. Морфология и свойства. Особенности репродукции и патогенеза. Лабораторная диагностика, иммунитет, терапия и профилактика.

7. Таксономия и общая характеристика вирусов – возбудителей гастроэнтеритов, распространение в природе.

8. Ротавирусы, систематика, морфология и репродукция.

9. Патогенез ротавирусной инфекции, пути инфицирования. Методы лабораторной диагностики.

10. Вирусы гепатита В и Д, систематика, морфология и репродукция.

11. Эпидемиология и патогенез гепатита В, механизмы персистенции. Методы лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и лечение гепатита В.

12. Вирус гепатита С, систематика, морфология и репродукция.

13. Эпидемиология (правило трех) и патогенез гепатита С, механизмы персистенции. Методы лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и лечение гепатита С.

14. Вирус гепатита G, общая характеристика.

15. Вирусы папилломмы, систематика, морфология и репродукция. Схема развития кожной бородавки. Роль в этиологии рака шейки матки. Иммунитет, диагностика и лечение.

 

Задания для подготовки

1. Зарисовать в тетрадь морфологию вириона пикорнавирусов, ротавируса, вирусов гепатита А, В, D и С. Обозначить на рисунках все структурные элементы.

2. Заполнить таблицу «Сравнительная характеристика энтеровирусов»:

 

Вирус Характеристика	Полиовирус	Вирус Коксаки	Вирус ЕСНО	НВА
Способы культивирования: – куриный эмбрион – культура клеток – организм лабораторных животных
Наличие сероваров
Источник инфекции
Пути передачи
Роль в патологии человека

 

3. Заполнить таблицу «Клинические формы полиомиелита»:

 

Клиническая форма инфекции	Локализация вируса	Эпидемическое значение
Инаппаратная (вирусоносительство)
Абортивная (малая болезнь)
Непаралитическая (менингеальная)
Паралитическая

 

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Освоить вирусологический метод диагностики полиомиелита.

 

Задача. У больного К., 12 лет, с клиническим диагнозом «Полиомиелит» взяты на исследование фекалии. Для выделения чистой культуры вируса был произведен посев на культуру клеток в среде 199. После выделения чистой культуры осуществлена идентификация вируса в реакции нейтрализации бляшкообразования. Используя готовые демонстрации, оценить результаты, оформить протокол. Сделать заключение.

 

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Для идентификации выделенного вируса смешивают равные объемы разведения вируса и соответствующих разведений иммунной сыворотки, смесь инкубируют в…   ПРОТОКОЛ

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

  ПРОТОКОЛ Цель:

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

ПРОТОКОЛ Цель:   Исследуемый материал Метод диагностики Результат     …

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица Серологические маркеры гепатита В Форма, период болезни … *Последние 1-2 недели инкубационного периода

Вопросы для подготовки

1. Арбовирусы, общая характеристика группы, экология и вызываемые заболевания.

2. Вирусы семейства Flaviviridae, систематика, морфология и репродукция.

3. Эпидемиология и патогенез клещевого энцефалита. Методы микробиологической диагностики: вирусологические и серологические. Специфическая профилактика и терапия.

4. Рабдовирусы, систематика, морфология и репродукция.

5. Бешенство как зоонозная инфекция, эпидемиология и патогенез бешенства. Методы микробиологической диагностики: вирусоскопический, вирусологический, серологические.

6. Специфическая профилактика бешенства: антирабические вакцины типа Ферми и культуральная. История создания вакцины против бешенства Пастером, фиксированный и «уличный» вирус бешенства. Механизм действия вакцин. Антирабический гаммаглобулин. Получение, показания к применению.

7. Понятие «Медленная инфекция», общая характеристика возбудителей и вызываемых заболеваний. Ретровирусы, систематика, экология и вызываемые заболевания.

8. ВИЧ-1 и ВИЧ-2, систематика, морфология и репродукция.

9. Антигенная изменчивость ВИЧ, экология и эпидемиология возбудителей.

10. Патогенез ВИЧ-инфекции (стадии). Методы лабораторной диагностики. Современные подходы к терапии и профилактики ВИЧ-инфекции.

11. Понятие о СПИД-ассоциированных инфекциях (возбудители, их общая характеристика).

12. Поксвирусы, их классификация и общая характеристика. Лабораторная диагностика натуральной оспы, специфическая профилактика.

13. Прионы, природа и причины возникновения. Вызываемые заболевания, эпидемиология и особенности патогенеза. Методы лабораторной диагностики и профилактики.

 

Задания для подготовки

 

1. Зарисовать в тетрадь морфологию вириона флавивирусов, рабдовирусов, ВИЧ и поксвируса. Обозначить на рисунках все структурные элементы.

 

2. Заполнить таблицу «Арбовирусы»:

 

Семейство	Свойства	Заболевание	Распространение
Togaviridae
Flaviviridae
Bunyaviridae
Arenaviridae
Hantavirus

 

Практическая работа

Р а б о т а №1 Цель:Освоить серологический метод диагностики вирусных энцефалитов.  

Вопросы для подготовки

ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ

Характерные свойства вирусов. Понятие о вирионе. Морфологические формы вирусов, размеры, ультраструктура, типы симметрии. Химический состав… Дефектные вирусы: дефектные интерферирующие частицы (ДИ), условно-дефектные… Типы взаимодействия вирусов с клеткой: продуктивный, абортивный, интегративный.

Нейротропные вирусы

Арбовирусы. Общая характеристика и классификация. Основные представители, вызывающие заболевания у человека. Патогенез геморрагических лихорадок (на… Возбудитель клещевого энцефалита. Таксономическое положение. Морфология.… Герпесвирусы. Таксономическое положение. Общая характеристика и классификация. Морфология. Репродукция. Свойства. Роль…

Энтеровирусы, Ротавирусы

Энтеровирусы.Таксономическое положение. Классификация. Морфология. Репродукция пикорнавирусов. Свойства. Роль энтеровирусов (вирусов Коксаки А и Б, вирусов ЕСНО) в инфекционной патологии человека. Патогенез заболеваний, вызываемых энтеровирусами. Особенности иммунитета. Принципы лабораторной диагностики.

Вирусы полиомиелита. Таксономическое положение. Свойства. Роль в инфекционной патологии человека. Источник, механизм и пути передачи. Патогенез полиомиелита. Особенности иммунитета. Лабораторная диагностика. Биопрепараты для специфической профилактики.

Ротавирусы. Таксономическое положение. Морфология. Репродукция. Свойства. Роль в инфекционной патологии человека. Патогенез ротавирусной инфекции. Особенности иммунитета. Принципы лабораторной диагностики.

 

Гепатотропные вирусы

Возбудитель вирусного гепатита В. Таксономическое положение. Морфология. Свойства. Антигены вируса гепатита В. Типы взаимодействия вируса с… Возбудитель вирусного гепатита С. Таксономическое положение. Морфология.… Вирус гепатита Д (дельта-вирус). Таксономическое положение. Морфология. Свойства. Особенности репродукции. Механизм…

Респираторные вирусы

Вирусы гриппа. Таксономическое положение. Морфология. Свойства вирусов гриппа А, В, С. Антигенные свойства вируса гриппа А, антигенная изменчивость… Парагриппозные вирусы. Таксономическое положение. Свойства. Особенности… Респираторно-синцитиальный вирус (РС-вирус).Таксономическое положение. Свойства. Роль в патологии человека. Принципы…

Ретровирусы, Онкогенные вирусы, прионы

Вирусы иммунодефицита человека (ВИЧ). Таксономическое положение. Морфология. Свойства. Пути передачи ВИЧ-инфекции. Репродукция. Патогенез… Прионы. История открытия, химическая природа, пути возникновения прионовых… Папилломавирусы. История открытия. Морфология и репродукция. Механизм развития кожной бородавки. Роль в этиологии рака…

Контрольные макропрепараты

1. Панель: реакция торможения гемагглютинации с парными сыворотками.

2. Ряды пробирок: цветная проба с парными сыворотками (серодиагностика полиомиелита).

3. Реакция торможения цитопатического действия (бляшкообразования).

 

Схема описания макропрепарата:

1. Цель приготовления препарата.

2. Методика приготовления препарата.

3. Функциональная характеристика объекта (механизм).

4. Описание и интерпретация результатов.

 

Приложение

Бактериологическое исследование при подозрении

На сепсис или бактериемию

Для обеспечения роста максимально большему числу возможных возбудителей посев крови производят сразу на несколько питательных сред, которые… В случае отсутствия видимого роста на 3, 5 и 8 дни из всех сред, кроме… При соблюдении всех правил асептики, выделение даже таких «непатогенных» видов микроорганизмов как эпидермальный…

Бактериологическое исследование грудного молока

Молоко засевают по методу Gould (см. бактериологическое исследование мочи) на ЖСА для выделения золотистого стафилококка и на среду Эндо для… Женщина не может быть донором, ей нельзя кормить, если она переболела любой…  

Бактериологическое исследование мочи

Исследованию подлежит средняя порция свободно выпущенной мочи, взятой в количестве 3-5 мл в стерильную посуду. Перед сбором необходимо наружные… Содержащиеся в моче микробы быстро размножаются при комнатной температуре, что… Осадок, полученный после центрифугирования мочи, высевают штрихом на необходимые питательные среды, подбор сред…

Бактериологическое исследование спинномозговой жидкости (СМЖ)

С целью выделения более широкого спектра возбудителей, производят посев ликвора на питательные среды в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от… Проводят посев 0,1 мл гнойного ликвора или 0,1 мл суспендированного в… В пробирку, к оставшемуся от посева осадку, добавляют 5 мл стерильного 0,1%-ного полужидкого агара и помещают в…

Бактериологическое исследование желчи

Посев исследуемого материала, производят в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на следующие питательные среды: 5%-ный кровяной агар,… По 0,1 мл каждой порции желчи, берут пипеткой и высевают на чашки Петри… Наиболее достоверным является исследование желчи, полученной во время операции. При дуоденальном зондировании возможна…

Бактериологическое исследование отделяемого дыхательных путей

Мокроту собирают утром во время приступа кашля в стерильную банку со стеклянными бусами, для «разбивания» кусочков гноя. Перед откашливанием… Промывные воды бронхов собирают при отсутствии или скудном количестве мокроты,… Пунктат инфильтрата или абсцесса легкого собирают до прорыва инфильтрата или абсцесса в дренирующий бронх.

Бактериологическое исследование раневого отделяемого

Посев исследуемого материала, производят в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22.04.85 г на следующие питательные среды кровяной агар и… При отсутствии роста в первые сутки посевы оставляют в термостате, ежедневно…  

Бактериологическое исследование отделяемого

Женских половых органов

Все сделанные посевы инкубируют при температуре 37°С, в течение нескольких суток просматривая посевы ежедневно. При появлении роста на плотных… Интерпретация результатов микробиологического исследования материалов,… Для ориентировочной оценки количественного соотношения видов микроорганизмов в ассоциации можно использовать следующие…

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ Список

 

Обязательная

2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учебник для мед. вузов. – СПб.: СпецЛит, 2008. – 767 с. 3. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / Под ред. В.И. Покровского. – 3-е… 4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / Под ред. А.А.Воробьева. – М.: Медицинское информационное…

Дополнительная

1. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии» /Под редакцией академика РАМН О.В. Бухарина. М.: Медицина; УрО РАН, 2002.

2. Медицинская микробиология / Под ред.акад. РАМН В.И.Покровского. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. – 768 с..ил. – (Серия «XXI век»).

3. Букринская А.Г. Вирусология. – М.: Медицина, 1986. – 336 с.

 

 

При составлении методического пособия была использована

  1. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии,… 2. Борисов Л.Б., Козьмин-СоколовБ.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям помедицинской микробиологии,…

МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ

Практикум

Ч.2 Возбудители бактериальных

И грибковых инфекций

Биология вирусов.

Возбудители вирусных инфекций

 

для самостоятельной подготовки студентов

лечебного факультета

 

Составители:

Вадим Вячеславович Леонов

Любовь Николаевна Деревянко

Татьяна Николаевна Соколова

 

Редактор

Технический редактор

Корректор

Оператор верстки

Дизайн

 

Подписано в печать 07.06.13. Формат 60´84 1/16

Гарнитура Таймс. Бумага офсетная. Усл. печ. л.3,26. Тираж 100 экз. Заказ

628011, г. Ханты-Мансийск, ул. Мира, д. 40

 

Информационно-издательский центр ХМГМА

628011, г. Ханты-Мансийск, ул. Мира, д. 40