МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ И ИММУНОЛОГИЯ

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ТУЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Кафедра Санитарно-гигиенических и профилактических дисциплин

ЧЕСТНОВА Т.В., СМОЛЬЯНИНОВА О.Л.

МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ

И ИММУНОЛОГИЯ

(Учебно-практическое пособие для студентов медицинских вузов).

ТУЛА – 2008

УДК 576.8

М 422

Рецензенты:…………

 

Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебно-практическое пособие / Под ред. М422 Т.В. Честновой, О.Л. Смольяниновой, –….., 2008. - ….с.

 

 

Учебно-практическое пособие написано сотрудниками кафедры санитарно-гигиенических и профилактических дисциплин Тульского государственного университета в соответствии с официально утвержденными программами преподавания микробиологии (бактериологии, вирусологии, микологии, протозоологии) и иммунологии для студентов медицинских вузов всех факультетов.

В учебно-практическом пособии дается описание бактериологической лаборатории, излагаются микроскопические методы исследования, основы приготовления питательных сред, содержатся сведения о морфологии, систематике и физиологии бактерий, грибов, простейших и вирусов. Также дается характеристика различных патогенных микроорганизмов, вирусов и методы их лабораторных исследований.

 

СОДЕРЖАНИЕ:

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Введение………………………………………………………………………………………………

Краткая история развития микробиологии…………………………………………………………

Тема 1. Морфология и классификация микроорганизмов………………………………………..

1.1. Микробиологические лаборатории, их оборудование, основы техники безопасности и правила работы в них………………………………………………………………………………..

1.2. Строение и классификация микроорганизмов…………………………………………………

1.3. Строение и классификация бактерий (прокариот)…………………………………………….

1.4. Строение и классификация грибов……………………………………………………………..

1.5. Строение и классификация простейших……………………………………………………….

1.6. Строение и классификация вирусов……………………………………………………………

Тест по теме…………………………………………………………………………………………..

Тема 2. Микроскопия………………………………………………………………………………..

2.1. Микроскопы, их устройство, виды микроскопии, техника микроскопирования микроорганизмов, правила обращения с микроскопом………………………………………………………….

2.2. Методы приготовления и окрашивания микроскопических препаратов……………………..

Тест по теме…………………………………………………………………………………………….

Тема 3. Физиология микроорганизмов……………………………………………………………….

3.1. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения…………………………………………….

3.2.Питательные среды, принципы их классификации, требования, предъявляемые к питательным средам, методы культивирования микроорганизмов…………………………………………..

3.3. Питание бактерий………………………………………………………………………………….

3.4. Метаболизм бактериальной клетки……………………………………………………………….

3.5. Виды пластического обмена………………………………………………………………………

3.6. Принципы и методы выделения чистых культур. Ферменты бактерий, их идентификация. Внутривидовая идентификация (эпидемиологическое маркирование)……………………………..

3.7. Особенности физиологии грибов, простейших, вирусов и их культивирование………………

3.8. Бактериофаги, их строение, классификация и применение……………………………………..

Тест по теме……………………………………………………………………………………………

Тема 4. Влияние условий внешней среды на микроорганизмы……………………………………..

4.1. Действие физических, химических и биологических факторов на микроорганизмы………….

4.2. Понятие о стерилизации, дезинфекции, асептике и антисептике. Методы стерилизации, аппаратура. Контроль качества дезинфекции…………………………………………………………..

Тест по теме……………………………………………………………………………………………..

Тема 5. Нормальная микрофлора организма человека……………………………………………….

5.1. Нормофлора, ее значение для микроорганиз. Понятие о транзиторной флоре, дисбиотических состояниях, их оценка, методы коррекции……………………………………………………..

Тема 6. Генетика микробов. …………………………………………………………………………..

6.1. Строение генома бактерий. Фенотипическая и генотипическая изменчивость. Мутации. Модификации.…………………………………………………………………………………………..

Генетические рекомбинайии микроорганизмов. Основы генной инженерии, практическое применение………………………………………………………………………………………………….

Тест по теме……………………………………………………………………………………………..

Тема 7. Противомикробные препараты……………………………………………………………….

7.1. Антибиотики природные и синтетические. Классификация антибиотиков по химической структуре, механизму, спектру и типу действия. Способы получения…………………………….

7.2. Лекарственная устойчивость бактерий, пути ее преодоления. Методы определения чувствительности к антибиотикам……………………………………………………………………………..

Тема 8. Учение об инфекции…………………………………………………………………………..

8.1. Понятие об инфекции. Формы инфекции и периоды инфекционных заболеваний. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности. Токсины бактерий, их природа, свойства, получение…………………………………………………………………………………………………….

8.2. Понятие об эпидемиологическом надзоре за инфекционным процессом. Понятие о резервуаре, источнике инфекции, путях и факторах передачи……………………………………………

Тест по теме……………………………………………………………………………………………..

ОБЩАЯ ИММУНОЛОГИЯ…………………………………………………………………………….

Тема 9. Иммунология……………………………………………………………………………………

9.1. Понятие об иммунитете. Виды иммунитета. Неспецифические факторы защиты…………….

9.2. Центральные и периферические органы иммунной системы. Клетки иммунной системы. Формы иммунного ответа………………………………………………………………………………

9.3. Комплемент, его структура, функции, пути активации. Роль в иммунитете…………………..

9.4. Антигены, их свойства и типы. Антигены микроорганизмов…………………………………..

9.5. Антитела и антителообразование. Структура иммуноглобулинов. Классы иммуноглобулинов и их свойства ………………………………………………………………………………………

96. Серологические реакции и их применение……………………………………………………….

9.7. Иммунодефицитные состояния. Аллергические реакции. Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность. Аутоиммунные процессы……………………………………………

9.8. Иммунопрофилактика, иммунотерапия…………………………………………………………..

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ……………………………………………………………………….

Тема 10. Возбудители кишечных инфекций………………………………………………………….

10.1. Сальмонеллы……………………………………………………………………………………..

10.2. Шигеллы………………………………………………………………………………………….

10.3. Эшерихии………………………………………………………………………………………….

10.4. Холерный вибрион……………………………………………………………………………….

10.5. Иерсинии ………………………………………………………………………………………….

Тема 11. Пищевые токсикоинфекции. Пищевые токсикозы…………………………………………

11.1. Общая характеристика и возбудители ПТИ…………………………………………………….

11.2. Ботулизм…………………………………………………………………………………………..

Тема 12. Возбудители гнойно-воспалительных заболеваний………………………………………

12.1. Патогенные кокки (стрептококки, стафилококки)……………………………………………..

12.2. Грамотрицательные бактерии (гемофильная, синегнойная палочки, клебсиеллы, протей)…

12.3. Раневые анаэробные клостридиальные и неклостридиальные инфекции……………………

Тема 13. Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций…………………………….

13.1. Коринебактерии……………………………………………………………………………………

13.2. Бордетеллы…………………………………………………………………………………………

13.3. Менингококки……………………………………………………………………………………..

13.4. Микобактерии……………………………………………………………………………………..

13.5. Легионеллы………………………………………………………………………………………..

Тема 14. Возбудители заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП)………………………

14.1. Хламидии…………………………………………………………………………………………..

14.2. Возбудитель сифилиса…………………………………………………………………………….

14.3. Гонококки………………………………………………………………………………………….

Тема 15. Возбудители риккетсиозов…………………………………………………………………..

Тема 16. Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций……………………………….

16.1. Франциселлы………………………………………………………………………………………

16.2. Бруцеллы………………………………………………………………………………………….

16.3.Возбудитель сибирской язвы……………………………………………………………………..

16.4. Возбудитель чумы…………………………………………………………………………………

16.5. Лептоспиры………………………………………………………………………………………..

Тема 17. Патогенные простейшие……………………………………………………………………..

17.1. Плазмодии малярии……………………………………………………………………………….

17.2. Токсоплазмы……………………………………………………………………………………….

17.3. Лейшмании………………………………………………………………………………………..

17.4. Возбудитель амебиаза…………………………………………………………………………….

17.5. Лямблии……………………………………………………………………………………………

Тема 18. Заболевания, вызываемые патогенными грибами ………………………………………..

ЧАСТНАЯ ВИРУСОЛОГИЯ…………………………………………………………………………..

Тема 19.Возбудители ОРВИ……………………………………………………………………………

19.1. Вирусы гриппа…………………………………………………………………………………….

19.2. Парагрипп. РС-вирусы……………………………………………………………………………

19.3. Аденовирусы………………………………………………………………………………………

19.4. Риновирусы………………………………………………………………………………………..

19.5. Реовирусы………………………………………………………………………………………….

Тема 20. Возбудители вирусных воздушно-капельных инфекций…………………………………..

20.1. Вирусы кори и паротита…………………………………………………………………………..

20.2. Вирус герпеса……………………………………………………………………………………...

20.3. Вирус краснухи……………………………………………………………………………………

Тема 21. Поксивирусы………………………………………………………………………………….

21.1. Возбудитель натуральной оспы………………………………………………………………….

Тема 22. Энтеровирусные инфекции…………………………………………………………………..

22.1. Вирус полиомиелита………………………………………………………………………………

22.2. ЕСНО-вирусы. Вирусы Коксаки…………………………………………………………………

Тема 23. Ретровирусы……………………………………………………………………………….......

23.1. Возбудитель ВИЧ-инфекции……………………………………………………………………..

Тема 24. Арбовирусные инфекции…………………………………………………………………….

24.1.Рабдовирусы……………………………………………………………………………………….

24.2. Флавивирусы………………………………………………………………………………………

24.3. Хантавирусы……………………………………………………………………………………….

Тема 25. Возбудители вирусных гепатитов……………………………………………………………

25.1. Вирус гепатита А………………………………………………………………………………….

25.2. Вирус гепатита В…………………………………………………………………………………..

25.3. Вирус гепатита С…………………………………………………………………………………..

 

 

ЧАСТЬ ПЕРВАЯ. ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Введение.

Микробиология – наука, которая изучает микроскопические существа, называемые микроорганизмами, их биологические признаки, систематику, экологию, взаимоотношение с другими организмами.

К числу микроорганизмов относятся бактерии, актиномицеты, грибы, в том числе мицелиальные грибы, дрожжи, простейшие и неклеточные формы – вирусы, фаги.

Микроорганизмы играют чрезвычайно важную роль в природе – осуществляют круговорот органических и неорганических (N, P, S и др.) веществ, минерализуют растительные и животные остатки. Но могут приносить большой вред – вызывая порчу сырья, пищевых продуктов, органических материалов. При этом могут образовываться токсические вещества.

Многие виды микроорганизмов являются возбудителями болезней человека, животных и растений.

В тоже время микроорганизмы в настоящее время широко используются в народном хозяйстве: с помощью разных видов бактерий и грибов получают органические кислоты (уксусную, лимонную и др.), спирты, ферменты, антибиотики, витамины, кормовые дрожжи. На основе микробиологических процессов работают хлебопечение, виноделие, пивоварение, производство молочных продуктов, квашение плодов и овощей, а также другие отрасли пищевой промышленности.

В настоящее время микробиология подразделяется на следующие разделы:

Медицинская микробиология – изучает патогенные микроорганизмы, вызывающие заболевания человека и разрабатывает методы диагностики, профилактики и лечения этих болезней. Изучает пути и механизмы их распространения и методы борьбы с ними. К курсу медицинской микробиологии примыкает обособленный курс – вирусология.

Ветеринарная микробиология изучает патогенные микроорганизмы, вызывающие заболевания животных.

Биотехнология рассматривает особенности и условия развития микроорганизмов, используемых для получения соединений и препаратов, используемых в народном хозяйстве и медицине. Она разрабатывает и совершенствует научные методы биосинтеза ферментов, витаминов, аминокислот, антибиотиков и других биологически активных веществ. Перед биотехнологией стоит также задача разработки мер предохранения сырья, продуктов питания, органических материалов от порчи микроорганизмами, исследование процессов, протекающих при их хранении и переработке.

Почвенная микробиология изучает роль микроорганизмов в образовании и плодородии почвы, в питании растений.

Водная микробиология исследует микрофлору водоемов, ее роль в пищевых цепях, в круговороте веществ, в загрязнении и очистке питьевой и сточной вод.

Генетика микроорганизмов, как одна из наиболее молодых дисциплин, - рассматривает молекулярные основы наследственности и изменчивости микроорганизмов, закономерности процессов мутагенеза, разрабатывает методы и принципы управления жизнедеятельностью микроорганизмов и получения новых штаммов для использования их в промышленности, сельском хозяйстве и медицине.

 

Краткая история развития микробиологии.

Начало физиологического периода связано с деятельностью великого французского ученого Луи Пастера (1822-1895г.г.). С именем Пастера связаны наиболее… Р.Кох, современник Пастера, ввел посевы на плотные питательные среды, подсчет… Иммунологический период в развитии микробиологии связан с именем российского биолога И.И. Мечникова, который открыл…

Тема 1. Морфология и классификация микроорганизмов.

Микробиологические лаборатории, их оборудование, основы техники безопасности и правила работы в них.

В бактериологических лабораториях работа проводится с патогенными микроорганизмами, поэтому безопасность проведения исследований в них… Микробиологическая лаборатория располагается в отдельно стоящем здании или в… Лаборатория должна иметь 2 входа: один – для сотрудников, другой – для доставки материала на исследование (допускается…

Тема 2. Микроскопия.

Микроскопы, их устройство, техника микроскопирования микроорганизмов, правила обращения с микроскопом. Виды микроскопии.

Все микроскопы устроены одинаково и состоят из механической части и оптической системы. Механическая часть состоит из основания штатива (1),… При микроскопировании рекомендуется пользоваться следующими приемами: 1. Препарат помещают на предметный столик микроскопа и закрепляют его боковыми зажимами.

Методы приготовления и окрашивания микроскопических препаратов.

Микроскопический метод исследования предусматривает наблюдение за живыми и убитыми бактериями в окрашенном и неокрашенном состоянии. С целью изучения формы и подвижности бактерий микроскопию микроорганизмов… Приготовление мазка «раздавленная капля».На предметное стекло по центру наносят каплю или жидкой культуры или…

Тема 3. Физиология микроорганизмов.

Рост и размножение микроорганизмов. Фазы роста.

Размножение бактерий – процесс, обеспечивающий увеличение числа особей в популяции. Бактерии характеризуются высокой скоростью размножения. Рост всегда предшествует размножению. Бактерии размножаются поперечным… Процесс деления бактериальной клетки начинается с репликации хромосомной ДНК. Репликация начинается в одной избранной…

Питательные среды, принципы их классификации, требования, предъявляемые к питательным средам, условия культивирования микроорганизмов.

Основой бактериологических работ являются питательные среды, нередко определяя своим качеством результаты исследования.

Основные требования, предъявляемые к питательным средам:

1. Питательные среды должны содержать все необходимые для питания микроба питательные вещества, т.е. обладать питательностью.

2. Иметь достаточную влажность

3. Иметь оптимальную рН (7,2-7,6) кислотность среды.

4. Обладать изотоничностью (концентрация NaCl 0,87%), для галофильных бактерий концентрация соли 1% и выше.

5. Иметь оптимальный электронный потенциал, свидетельствующий о содержании в среде растворенного кислорода. Он должен быть высоким для аэробов и низким для анаэробов.

6. Быть прозрачными, чтобы был виден рост бактерий, особенно в жидких средах.

7. Быть стерильными (чтобы не было других бактерий).

 

Для приготовления питательных сред используют продукты животного происхождения (мясо, рыба, кровь, яйца, молоко) и продукты растительного происхождения (картофель). Также используют синтетические питательные среды, составленные из химических соединений.

Источником азота для бактерий служат простые аммонийные соединения, аминокислоты или пептоны; источником углерода – сахар, многоатомные спирты, органические кислоты. Потребность бактерий в неорганических элементах удовлетворяется прибавляемыми к питательной среде солями: NaCl, КН₂РО₄, К₂НРО₄.

В зависимости от консистенции питательные среды могут быть: жидкими, полужидкими и плотными. Плотность среды достигается добавлением агара. Агар- полисахарид, получаемый из водорослей. Он плавится при температуре 100 оС, остывает при температуре 45-50 оС. Для полужидких сред агар добавляют в концентрации 0,5%, для плотных – 1,5-2%. Жидкие среды не содержат агар-агара.

По составу питательные среды могут быть простыми и сложными. К простым средам относятся пептонная вода, мясопептонный бульон, мясопептонный агар, агар Хоттингера. Сложные – это простые с добавлением дополнительного питательного компонента (сахарный, сывороточный, желчный бульоны, кровяной, сывороточный, желточно-солевой агары, среда Кита-Тароцци, Вильсона-Блера).

В зависимости от назначения среды подразделяются:

1. Общего назначения –для культивирования большинства бактерий (мясопептонный агар, кровяной агар).

2. Специального назначения:

а) элективные среды – это среды, на которых растет какой-то определенный микроорганизм. Например, щелочной агар, имеющий рН 9, служит для выделения холерного вибриона.

б) среды обогащения – это такие среды, которые стимулируют рост какого-то определенного микроорганизма, ингибируя рост других. Например, магниевая и селенитовая среды стимулируют рост бактерий рода сальмонелла, ингибируя рост кишечной палочки.

в) дифференциально-диагностические среды служат для изучения ферментативной активности бактерий (среды Гисса).

г) комбинированные питательные среды сочетают в себе элективную среду, подавляющую рост сопутствующей флоры и дифференциально-диагностическую (среда Плоскирева для выделения шигелл, висмут-сульфитный агар – для сальмонелл). Обе эти среды ингибируют рост кишечной палочки.

С целью дифференциации прототрофных и ауксотрофных бактерий используют селективные среды. Прототрофы растут на минимальной среде, содержащей только соли и углеводы, так как они сами способны синтезировать нужные им для развития метаболиты. Ауксотрофы нуждаются в средах, содержащих определенные аминокислоты, витамины, т.е. факторы роста.

Приготовление питательных сред – один из наиболее ответственных и трудных участков работы бактериологической работы.

В настоящее время медицинской промышленностью организовано производство консервированных сред. Сухие питательные среды находятся в пластмассовых банках с плотно завинчивающимися крышками, обеспечивающими герметичность.

Условия культивирования бактерий:

 

1. Наличие полноценной питательной среды.

2. Определенная температура культивирования (оптимальная температура 37⁰С).

3. Определенная атмосфера культивирования. Для строгих аэробов необходим кислород, поэтому они хорошо растут на поверхности агара чашках Петри или в тонком верхнем слое жидкой среды. Для роста аэробов в глубинном слое жидкой среды необходимо непрерывно перемешивать или встряхивать питательные среды, чтобы кислород распределялся по всему объему среды. Для факультативных анаэробов используют те же методы. Микроаэрофилы размножаются при пониженном парциальном давлении кислорода. Концентрация СО₂ должна быть 1-5%. Для этого используют специальные СО₂ –инкубаторы или посевы помещают в эксикаторы, в которых устанавливают горячую свечу. Для роста облигатных анаэробов необходимо исключить доступ кислорода. Для этого добавляют к питательным средам редуцирующих кислород веществ (тиогликолевая кислота), регенерация от кислорода воздуха жидких питательных сред путем их кипячения, использование поглотителей кислорода, помещая их в герметически закрываемые емкости «газпаки», использование анаэростатов.

4. Время культивирования (18-48 часов). Для культивирования микобактерий туберкулеза (3-4 недели).

5. Освещение. Для выращивания фототрофных бактерий необходим свет.

6. Культивирование облигатных внутриклеточных паразитов-бактерий, относящихся к родам риккетсия, эрлихия, коксиелла, хламидия осуществляют на культурах клеток или в организме животных и членистоногих, а также в куриных эмбрионах.

В промышленных условиях для получения биомассы бактерий или грибов с целью получения антибиотиков, вакцин, диагностических препаратов культивирование осуществляется в аппаратах (ферментерах) при строгом соблюдении оптимальных параметров роста и размножения культур.

Питание бактерий.

Среди необходимых питательных веществ выделяют: углерод, кислород, водород, азот, фосфор, калий, магний, кальций. Кроме органогенов, необходимы… Для бактерий характерно многообразие источников получения питательных… В зависимости от источника получения углерода бактерии делят на: 1) аутотрофы (используют неорганические вещества –…

Метаболизм бактериальной клетки.

В зависимости от акцепторов протонов и электронов среди бактерий различают аэробы, факультативные анаэробы и облигатные анаэробы. Для аэробов… Облигатные аэробы(бруцеллы, легионеллы, псевдомонады, микобактерии,… Облигатные анаэробы(бифидобактерии, лактобактерии,клостридии)не используют кислород для получения энергии. Тип…

Виды пластического обмена.

3) липидный; 4) нуклеиновый. Белковый обмен характеризуется катаболизмом и анаболизмом. В процессе… Распад белков в аэробных условиях называется тлением, в анаэробных – гниением. В результате распада аминокислот клетка…

Принципы и методы выделения чистых культур. Ферменты бактерий, их идентификация. Внутривидовая идентификация (эпидемиологическое маркирование).

Выделение чистой культуры микробов является обяза­тельным этапом всякого бактериологического исследования. Чистая культура необходима для изучения… Для выделения чистых культур микробов из материалов, содержащих обильную… Очень широко применяются элективные питательные сре­ды, стимулирующие развитие тех микроорганизмов, чистую культуру…

Рост бактерий с равномерным помутнением среды

3. Пристеночный рост бактерий выражается в том, что питательная среда, находящаяся в пробирке, остается совершенно прозрачной. Бактерии растут,… 4. Поверхностный рост бактерий характеризуется появлением на поверхности… Рост на полужидкой питательной среде.Для выявления особенностей микробного роста на полужидкой питательной среде…

Особенности физиологии грибов, простейших, вирусов и их культивирование.

Культивирование грибов производится в аэробных условиях при температуре 22-370С на питательных среда, содержащих азотистые и углеродсодержащие… По характеру роста на агаровых питательных средах патогенные грибы растут в… На жидких средах многие виды грибов растут в виде войлокообразного осадка на дне и пристеночно. Грибы вырабатывают…

Бактериофаги, их строение, классификация, применение.

Бактериофаги– вирусы бактерий. История открытия бактериофага связана с именами Н.Ф. Гамалеи, наблюдавшего спонтанный лизис сибиреязвенных бактерий в 1898г. Английский бактериолог Ф. Туорт описал способность фильтрата стафилококков растворять свежую культуру этих же бактерий (1915г.). Французский ученый Ф.Д^, Эррель подробно изучил взаимодействие фага и бактерий и сделал заключение, что открытый им литический агент является вирусом бактерий и назвал его «бактериофагом» - пожирателем бактерий.

Бактериофаги широко распространены: они выявлены у большинства бактерий, а также у других микроорганизмов, например, у грибов и поэтому их часто называют фагами. Наиболее детально изучена структура крупных фагов, к которым относятся фаги E. Coli (Т2, Т4, Т6). Они состоят из головки икосаэдрического типа, в которой заключена или ДНК, или РНК. Большинство фагов содержат двунитевую ДНК, замкнутую в кольцо. Хвостовой отросток имеет внутри полый цилиндрический стержень, сообщающийся с головкой, а снаружи – чехол, способный к сокращению наподобие мышцы. Чехол присоединен к воротничку, окружающему стержень около головки. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с шипами от которых отходят нитевидные структуры – фибриллы.

По морфологии фаги подразделяются на 6 групп: 1) фаги с длинным отростком, чехол которого сокращается; 2) фаги с длинным отростком, чехол которого не сокращается; 3) фаги с короткими отростками; 4) фаги с аналогом отростка; 5)фаги без отростка; 6) нитевидные фаги.

Бактериофаги содержат группоспецифические и типоспецифические антигены, обладают иммуногенными свойствами, т.е. синтезируют специфические антитела в организме.

По специфичности взаимодействия различают следующие бактериофаги: 1) поливалентные – взаимодействуют с родственными видами бактерий; 2) моновалентные – взаимодействуют с бактериями определенного вида; 3) типовые – взаимодействуют с отдельными типами бактерий данного вида.

Взаимодействие фагов с бактериями может протекать: 1) по продуктивному типу – образуется фаговое потомство и бактерии лизируются; 2) по абортивному типу – фаговое потомство не образуется и бактерии сохраняют свою жизнедеятельность; 3) по интегративному типу – геном фага встраивается в хромосому бактерии и сосуществует с ней.

В зависимости от типа взаимодействия различают вирулентные и умеренные бактериофаги.

Вирулентные бактериофаги взаимодействуют с бактерией по продуктивному типу. Адсорбция фагов на бактериальной клетке происходит при наличии комплементарных рецепторов в ее клеточной стенке. На бактериях, лишенных клеточной стенки бактериофаги не адсорбируются. Фаги, имеющие хвостовой отросток, прикрепляются к бактериальной клетке свободным концом отростка (фибриллами, базальной пластинкой). В результате активации АТФ чехол хвостового отростка сокращается и стержень с помощью лизоцима, растворяющего прилегающий фрагмент клеточной стенки как бы просверливает оболочку клетки. При этом ДНК фага, содержащаяся в его головке, проходит в форме нити через канал хвостового стержня и инъецируется в клетку, а капсид фага остается снаружи бактерии. Инъецированная внутрь бактерии нуклеиновая кислота подавляет биосинтез компонентов клетки, заставляя ее синтезировать нуклеиновую кислоту и белки фага, затем происходит самосборка частиц фага. В результате изменения внутриклеточного осмотического давления и действия фагового лизоцима происходит разрушение оболочки, лизис бактерии и выход фагов из нее.

Умеренные бактериофаги в отличие от вирулентных взаимодействуют с чувствительными бактериями либо по продуктивному, либо по интегративному типам. При интегративном типе взаимодействия ДНК умеренного фага встраивается в хромосому бактерии, реплицируется синхронно с геном размножающейся бактерии, не вызывая ее лизиса. ДНК бактериофага, встроенная в хромосому бактерии, называется профагом, а культура бактерий – лизогенной. Такое сосуществование бактерии и умеренного бактериофага называется лизогенией.

Бактериофаги используют: 1) в лабораторной диагностике инфекций при внутривидовой идентификации бактерий, т.е. определения фаговара. Для этого применяют метод фаготипирования. На чашку с плотной питательной средой засевают «газоном» чистой культурой возбудителя и наносят капли различных диагностических типоспецифических фагов. Фаговар бактерии определяется тем типом фага, который вызвал ее лизис. Методику фаготипирования используют для выявления источника и путей распространения инфекции (эпидемиологическое маркирование). Например, при возникновении массовых заболеваний стафилококковой этиологии в родильных домах, детских и больничных учреждениях большое значение приобретает выявление источников инфекции и установление эпидемиологических связей. Решение этой задачи возможно только методом фаготипирования стафилококков, подтверждающим идентичность микроорганизмов, выделяемых у больных, носителей и объектов внешней среды.

Таким образом, при проведении эпидемиологического обследования метод фаготипирования бактерий дает возможность: 1) устанавливать или исключать предполагаемые источники инфекции; 2) прослеживать эпидемические связи; 3) отличать местные случаи от «привозных» и спородические заболевания от эпидемических.

2) фаги применяют также для лечения и профилактики ряда бактериальных инфекций. Производят брюшнотифозный, сальмонеллезный, дизентерийный, синегнойный, стафилококковый, стрептококковый фаги; комбинированные: колипротейный, пиобактериофаги. Бактериофаги назначают по показаниям перорально, парентерально или местно в виде жидких, таблетированных форм, свечей, аэрозолей.

3) бактериофаги широко применяют в генной инженерии в качестве векторов для получения рекомбинантных ДНК.

Тесты по теме:

1. Требования, предъявляемые к питательным средам:

 

а) плотные

б) рН 5,0-5,2

в) рН 7,2-7,6

г) стерильные

д) концентрация NaCl 0,5%

 

2. Концентрация агара в полужидких питательных средах:

 

а) 0,1%

б) 0,5%

в) 1,0%

г) 1,5-2,0%

 

3. К простым питательным средам относятся:

 

а) кровяной агар

б) пептонная вода

в) сахарный бульон

г) мясопептонный агар

 

4. К сложным питательным средам относятся:

 

а) кровяной агар

б) пептонная вода

в) сахарный бульон

г) мясопептонный агар

 

5. Среды, на которых лучше растет какой-то определенный микроорганизм:

 

а) дифференциально-диагностические

б) элективные

в) полужидкие

г) среды обогащения

6. Среды, стимулирующие рост определенного микроорганизма, но при этом ингибируют рост других:

 

а) дифференциально-диагностические

б) элективные

в) полужидкие

г) среды обогащения

 

7. Среды, служащие для изучения ферментативной активности бактерий:

 

а) дифференциально-диагностические

б) элективные

в) полужидкие

г) среды обогащения

8. Питательная среда, используемая при культивировании бактерий кишечной группы:

а) среда Чистович

б) среда Эндо

в) среда Сабуро

г) среда Вильсон-Блер

 

9. Питательная среда, используемая при культивировании стафилококков:

 

а) среда Чистович

б) среда Эндо

в) среда Сабуро

г) среда Вильсон-Блер

 

10. Питательная среда, используемая при культивировании грибов:

 

а) среда Чистович

б) среда Эндо

в) среда Сабуро

г) среда Вильсон-Блер

 

11. При культивировании анаэробов используют:

а) среда Чистович

б) среда Эндо

в) среда Сабуро

г) среда Вильсон-Блер

 

12. При культивировании вирусов используют:

 

а) куриные эмбрионы

б) простые питательные среды

в) сложные питательные среды

г) культуры клеток

 

13. Перечислите фазы размножения бактерий:

 

а) первичная

б) стационарная

в) роста

г) логарифмическая

 

14. Скопление микроорганизмов одного вида:

а) колония

б) чистая культура

в) бактериофаг

г) пигмент

 

15. Рост бактерий на жидких питательных средах:

а) в виде пленки

б) колоний

в) сплошного налета

г) осадка

д) равномерного помутнения среды

е) по «уколу»

 

16. К каким свойствам относится характер роста выделенной культуры на питательных средах:

 

а) морфологические

б) культуральные

в) сахаролитические

г) гемолитические

д) протеолитические

 

17. Способность разрушать эритроциты на средах с кровью относится к свойствам:

 

а) морфологические

б) культуральные

в) сахаролитические

г) гемолитические

д) протеолитические

 

18. Способность расщеплять белки на средах, содержащих желатин, молоко, сыворотку относится к свойствам:

 

а) морфологические

б) культуральные

в) сахаролитические

г) гемолитические

д) протеолитические

 

 

19. Бактерии, использующие в питании неорганический углерод:

а) гетеротрофы

б) автотрофы

в) фототрофы

г) хемотрофы

 

20. Бактерии, использующие в питании органический углерод:

 

а) гетеротрофы

б) автотрофы

в) фототрофы

г) хемотрофы

 

 

21. Бактерии, получающие энергию за счет окислительно-восстановительных реакций:

а) гетеротрофы

б) автотрофы

в) фототрофы

г) хемотрофы

 

22. Бактерии, получающие энергию за счет света:

 

а) гетеротрофы

б) автотрофы

в) фототрофы

г) хемотрофы

 

23. Бактерии, которые питаются мертвым органическим материалом:

а) сапрофиты

б) паразиты

в) гетеротрофы

г) факультативные паразиты

 

24. Бактерии, которые питаются за счет макроорганизма:

 

а) сапрофиты

б) паразиты

в) гетеротрофы

г) факультативные паразиты

 

25. Микроорганизмы, которые растут и размножаются в присутствии кислорода:

а) облигатные аэробы

б) микроаэрофилы

в) строгие анаэробы

г) аэротолерантные м/о

д) факультативные анаэробы

 

26. Микроорганизмы, которые способны расти и размножаться как в присутствии кислорода, так и в его отсутствии:

 

 

а) облигатные аэробы

б) микроаэрофилы

в) строгие анаэробы

г) аэротолерантные м/о

д) факультативные анаэробы

 

27. Микроорганизмы, для которых кислород является токсичным:

 

а) облигатные аэробы

б) микроаэрофилы

в) строгие анаэробы

г) аэротолерантные м/о

д) факультативные анаэробы

28. Вирусы, проникающие в бактерии, паразитирующие в них вплоть до гибели:

 

а) ДНК-вирусы

б) РНК-вирусы

в) бактериофаги

г) аденовирусы

29. Бактериофаги состоят:

 

а) капсид

б) головка

в) хвостовой отросток

г) базальная пластина

 

30. По специфичности взаимодействия бактериофаги различают:

 

а) поливалентные

б) продуктивные

в) абортивные

г) моновалентные

 

31. Взаимодействие фагов с бактериями при котором образуется фаговое потомство и лизис бактерий протекает по типу:

 

а) абортивному

б) интегративному

в) продуктивному

 

32. Взаимодействие фагов с бактериями при котором геном фага встраивается в хромосому бактерии и сосуществует в ней протекает по типу:

 

а) абортивному

б) интегративному

в) продуктивному

 

33. Фаги, взаимодействие которых с бактерией происходит либо по продуктивному, либо по интегративному типу называют:

 

а) вирулентные

б) поливалентные

в) умереннные

 

34. Практическое применение фагов:

 

а) для культивирования вирусов

б) для лечения и профилактики инфекционных заболеваний

в) в генной инженерии

Тема 4. Влияние условий внешней среды на микроорганизмы.

Действие физических, химических факторов на микроорганизмы.

Физические, химические и биологические факторы окружающей среды оказывают на микроорганизмы: 1) бактерицидное – приводящее к гибели клетки; 2)бактериостатическое – подавляющее размножение микроорганизмов; 3) мутагенное – изменяющее наследственные свойства микробов.

Влияние физических факторов.

Низкие температуры приостанавливают гнилостные и бродильные процессы. Только отдельные патогенные виды микроорганизмов являются весьма… Большинство вегетативных форм бактерий погибает при температуре 58-600С в… Высушивание. Микроорганизмы обладают различной устойчивостью к высушиванию, к которому чувствительны гонококки,…

Влияние химических веществ.

Бактерицидные химические вещества по их действию на бактерии подразделяют на поверхностно-активные вещества, фенолы и их производные, красители,… Поверхностно-активные вещества (ПАВ) приводят к нарушению нормального… Фенол, крезол, лизолпервоначально повреждают клеточную стенку, а затем и белки клетки.

Влияние биологических факторов.

1) полезные взаимоотношения: Метабиоз – взаимоотношение микроорганизмов, при котором один из них использует… Мутуализм– взаимовыгодные взаимоотношения разных организмов (лишайники-симбиоз гриба и сине-зеленой водоросли).

Понятие о стерилизации, дезинфекции, асептике и антисептике. Методы стерилизации, аппаратура. Контроль качества дезинфекции.

Тепловая стерилизация основана на чувствительности микробов к высокой температуре. Для тепловой стерилизации применяют, в основном, сухой жар и пар… Химическая стерилизация предполагает использование токсичных газов: оксида… В последнее время в связи с широким распространением в медицинской практике изделий из термолабильных материалов,…

Тема 5. Микрофлора организма человека.

Нормофлора, ее значение для микроорганизма. Понятие о транзиторной флоре. Понятие о дисбиотических состояниях. Их оценка. Методы коррекции.

Постоянная(резидентная, индигенная, или автохтонная) микрофлора представлена микроорганизмами постоянно присутствующими в организме. Транзиторная(непостоянная или аллохтонная) – микрофлора не способна к… Постоянную микрофлору можно разделить на облигатную и факультативную. Облигатная микрофлора (бифидобактерии,…

Тема 6. Генетика микробов.

Строение бактериального генома. Фенотипическая и генотипическая изменчивость микроорганизмов. Мутации. Модификации.

Плазмиды– дополнительный внехромосомный генетический материал. Представляет собой кольцевую, двунитевую молекулу ДНК, гены которой кодируют… 1) R – плазмиды. Обеспечивают лекарственную устойчивость; 2) F – плазмиды кодируют пол у бактерий. Мужские клетки содержат (F+) содержат F- плазмиду, женские (F-) – не…

Генотипические рекомбинации микроорганизмов. Основы генной инженерии. Практическое применение.

1) трансформация; 2) трансдукция; 3) конъюгация.

Генетическая инженерия и область ее применения в биотехнологии.

Экспрессируемый ген в виде рекомбинантной ДНК (плазмида, фаг, вирусная ДНК) встраивается в бактериальную или животную клетку, которая приобретает… Методом генетической инженерии созданы сотни препаратов медицинского и… Разработаны и в ближайшие годы будут использованы в практике генно-инженерные вакцины против малярии, ВИЧ-инфекции,…

Тема 7. Противомикробные препараты

 

Антибиотики. Природные и синтетические. Классификация антибиотиков по химической структуре, механизму, спектру и типу действия. Способы получения.

Химиотерапевтические препараты –это лекарственные вещества, используемые для подавления жизнедеятельности и уничтожения микроорганизмов в тканях и средах больного, обладающие избирательным, этиотропным действием.

По направленности действия химиотерапевтические препараты делят на:

1) противопротозойные;

2) противогрибковые;

3) противовирусные;

4) антибактериальные.

 

По химическому строению выделяют несколько групп химиотерапевтических препаратов:

1) Сульфаниламидные препараты (сульфаниламиды). Они нарушают процесс получения микробами необходимых для жизни и развития ростовых факторов – фолиевой кислоты и др. веществ. К этой группе относят стрептоцид, норсульфазол, сульфаметизол, сульфаметаксазол идр.

2) Производные нитрофурана.Механизм действия состоит в блокировании нескольких ферментных систем микробной клетки. К ним относят фурацилин, фурагин, фуразолидон, нитрофуразон и др.

3) Хинолоны.Нарушают различные этапы синтеза ДНК микробной клетки. К ним относят налидиксовую кислоту, циноксацин, норфлоксацин, ципрофлоксацин.

4) Азолы – производные имидазола.Ингибируют биосинтез стероидов, что приводит к повреждению наружной клеточной мембраны грибов и повышению ее проницаемости. К ним относят клотримазол, кетоконазол, флуконазол и др.

5) Диаминопиримидины. Нарушают метаболизм микробной клетки. К ним относят триметоприм, пириметамин.

6) Антибиотики –это группа соединений природного происхождения или их синтетических аналогов.

Антибиотики – это химиотерапевтические препараты из химических соединений биологического происхождения (природные), а также их полусинтетические производные и синтетические аналоги, которые в низких концентрациях оказывают избирательное повреждающее или губительное действие на микроорганизмы и опухоли.

Требования, предъявляемые к антибактериальным препаратам:

1. Они должны растворяться в воде, поскольку только в таком виде могут быть доставлены во внутреннюю среду организма.
2. Препараты должны быть достаточно стабильны во внутренней среде организма, но не накапливаться в нем.
3. Антибактериальные препараты должны быть безвредны, минимальные побочные действия и отсутствовать тератогенные и мутагенные эффекты.

Классификация антибиотиков.

В основу классификации антибиотиков положены разные принципы:

1. По способу получения (природные, синтетические и полусинтетические).

2.По направленности действия (антибактериальные, противогрибковые, противоопухолевые).

3. По числу видов (широкоспекторные, узкого спектра действия).

4.По происхождению продуцентами большинства антибиотиков являются грибы (плесневые- пенициллин, стрептомицин, тетрациклин), бактерии (полимиксин, грамицидин), высшие растения (фитонциды чеснока и лука), ткани животных и рыб (лизоцим, интерферон).

5. По химическому строению:

Бета-лактамы, гликопептиды, аминогликозиды, тетрациклины, макролиды, линкозамиды, левомицетин, рифамицины, полипептиды, полиены, разные антибиотики.

6. По механизму антимикробного действия антибиотики делят на несколько групп:

1. ингибиторы синтеза клеточной стенки- нарушают синтез микробной стенки (бета-лактамы, циклосерин, ванкомицин, тейкоплакин);

2. вызывающие повреждение цитоплазматической мембраны (циклические полипептиды, полиеновые антибиотики);

3. подавляющие белковый синтез и ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот (группа левомицетина, тетрациклина, макролиды, линкозамиды, аминогликозиды, фузидин, анзамицины).

Лекарственная устойчивость бактерий, пути ее преодоления. Методы определения чувствительности к антибиотикам.

Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам определяют диско-диффузным (метод диффузии в агар с применением бумажных дисков с антибиотиками) и метод разведений антибиотикак в плотной или жидкой питательной среде. Выбор метода зависит от цели исследования и возможностей лаборатории. Диско-диффузный метод следует рассматривать как качественный. Методы разведения – более точные количественные способы исследования. Их применяют в особо важных практических случаях и научно-исследовательской работе.

Диско-диффузный метод.

На поверхность подсушенной питательной среды в чашке Петри наносят 1мл исследуемой культуры (18-20 часовой бульонной культуры или стомиллионной…

Метод серийных разведений.

Для исследования используют мясопептонный бульон. Основные растворы антибиотиков приготавливают путем взвешивания их порошка и растворения его в стерильной дистиллированной воде, чтобы получить определенную удобную концентрацию. Разведения антибиотиков готовят путем разбавления основного раствора антибиотика бульоном. Для этого используют 11 пробирок. В первую пробирку вносят 2 мл раствора антибиотика и переносят по 1 мл раствора антибиотика из первой пробирки в каждую последующую. Затем суточную бульонную культуру разводят до 10⁵ – 10⁶ микробных тел в 1 мл и вносят по 1 мл во все пробирки с разведениями антибиотика. Посевы инкубируют при 37⁰С. Отмечают первую пробирку с задержкой роста микробов.

Ускоренные методы определения чувствительности.

Ускоренное определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам осуществляется некоторыми зарубежными автоматизированными системами микробиологических исследований. В кюветах панели содержатся дегидрированные субстраты или диски с антибиотиками. Каждый антибиотик в кювете представлен в одной концентрации, соответствующей критерию принадлежности бактерий к группе «чувствительных» к антибиотику. Одновременно тестируется 20 и более антибиотиков. После внесения взвеси испытуемых бактерий посевы инкубируют при 35-370С в течение 4-5 часов. Результаты регистрируют спектрофотометрически или кондуктометрически сразу при появлении размножения бактерий в контроле без антиб

 

Тема 8. Учение об инфекции.

Понятие об инфекции. Формы инфекции и периоды инфекционных заболеваний. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности. Токсины бактерий, их природа, свойства, получение.

Инфекеция –это совокупность биологических реакций, которыми макроорганизм отвечает на внедрение возбудителя.

Основными формами проявления инфекций являются:

1) бактерионосительство, персистенция, живая вакцинация;

2) инфекционная болезнь; имеются клинические проявления инфекции, эти реакции могут привести к летальному исходу.

Инфекционный процесс – ответная реакция коллектива популяции на внедрение и циркуляцию в ней микробных агентов.

Инфекционные болезни имеют ряд характерных особенностей, отличающих их от других болезней:

1) инфекционные болезни имеют своего возбудителя – микроорганизм;

2) инфекционные болезни контагиозны, т.е. способны передаваться от больного к здоровому;

3) инфекционные болезни оставляют после себя более или менее выраженную невосприимчивость или повышенную чувствительность к данному заболеванию;

4) для инфекционных болезней характерен ряд общих признаков: лихорадка, симптомы общей интоксикации, вялость, адинамия;

5) инфекционные болезни имеют четко выраженную стадийность, этапность;

Для возникновения инфекционного заболевания необходимо сочетание следующих факторов:

1) наличие микробного агента;

2) восприимчивости макроорганизма;

3) наличия среды, в которой происходит это взаимодействие.

Микробный агент – это патогенные и условно-патогенные микроорганизмы.

Существенное значение для возникновения инфекционного заболевания имеет инфицирующая доза возбудителя – минимальное количество микробных клеток, способных вызвать инфекционный процесс. Инфицирующие дозы зависят от видовой принадлежности возбудителя, его вирулентности и состояния неспецифической и иммунной защиты.

Ткани, лишенные физиологической защиты против конкретного вида микроорганизма, служат местом его проникновения в макроорганизм, или входными воротами инфекции. Входные ворота определяют локализацию возбудителя в организме, патогенетические и клинические особенности заболевания.

Внешняя среда может оказывать влияние как на макроорганизм, так и на микробов-возбудителей. Это природно-климатические, социально-экономические, культурно-бытовые условия.

Классификация инфекций:

1. По этиологии: бактериальные, вирусные, протозойные, микозы, микст-инфекции.
2. По количеству возбудителей:моноинфекции, полиинфекции.
3. По тяжести течения: легкие, тяжелые, средней тяжести.
4. По длительности: острые, подострые, хронические, латентные.
5. По путям передачи: горизонтальные (воздушно-капельный путь, фекально-оральный, контактный, трансмиссивный, половой), вертикальные (от матери к плоду-трансплацентарный, от матери к новорожденному в родовом акте), артифициальные (искусственные) – при инъекциях, обследованиях, операциях.

 

1. В зависимости от локализации возбудителя различают:

1) очаговую инфекцию, при которой микроорганизмы локализуются в местном очаге и не распространяются по всему организму;

2) генерализованную инфекцию, при которой возбудитель распространяется по организму лимфогенным и гематогенным путем. При этом развивается бактеремия или вирусемия. Наиболее тяжелая форма – сепсис.

 

1. Выделяют также: 1) экзогенные инфекции –возникают в результате заражения человека патогенными микроорганизмами, поступающими из окружающей среды с пищей, водой, воздухом, почвой, выделениями больного человека, реконвалесцента и микробоносителя; 2) эндогенные инфекции; вызываются представителями нормальной микрофлоры- условно-патогенными микроорганизмами самого индивидуума.

Разновидность эндогенных инфекций – аутоинфекции, они возникают в результате самозарожения путем переноса возбудителя из одного биотопа в другой.

Выделяют следующие периоды инфекционных болезней:

1) инкубационный –от момента проникновения возбудителя в организм до появления первых признаков заболевания. Продолжительность от нескольких часов до нескольких недель. Больной не заразен;

2) продромальный– появление первых неясных общих симптомов. Возбудитель интенсивно размножается, колонизирует ткань, начинает продуцировать ферменты и токсины. Продолжительность от нескольких часов до нескольких дней;

3) разгар болезни –появление специфических симптомов. Возбудитель продолжает интенсивно размножаться, накапливаться, выделять в кровь токсины и ферменты. Происходит выделение возбудителя из организма, поэтому больной представляет опасность для окружающих. В начале данного периода в крови обнаруживаются специфические антитела;

4) исход –могут быть разные варианты:

а) летальный исход;

б) выздоровление(клиническое и микробиологическое). Клиническое выздоровление: симптомы заболевания угасли, но возбудитель еще находится в организме. Этот вариант опасен формированием носительства и рецидивом заболевания. Микробиологическое –это полное выздоровление;

в) хроническое носительство.

 

Реинфекциейназывают заболевание, возникающее после перенесенной инфекции в случае повторного заражения тем же возбудителем.

Суперинфекция возникает, когда на фоне течения одного инфекционного заболевания происходит заражение еще одним возбудителем.

Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности.

Патогенные виды потенциально способны вызывать инфекционное заболевание. Патогенность – это способность микроорганизмов, попадая в организм,… Условно-патогенные бактерии могут вызывать инфекционное заболевание при… Сапрофитные бактерии никогда не вызывают заболевния, так как они не способны размножаться в тканях макроорганизма.

Токсины бактерий, их природа, свойства, получение.

По физико-химической структуре и биологическим свойствам токсины бактерий делятся на 2 группы: белковые токсины и эндотоксины. По степени связи с бактериальной клеткой белковые бактериальные токсины… Класс А – секретируемые во внешнюю (дифтерийный гистотоксин, дермонекротксин, холероген холерного вибриона);

Понятие об эпидемиологическом надзоре за инфекционным процессом. Понятие о резервуаре, источнике инфекции, путях и факторах передачи.

Эпидемический процесс обуславливает непрерывность взаимодействия трех его элементов: 1) источник инфекции; 2) механизмы, пути и факторы передачи;

ОБЩАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Тема 9. Иммунология.

Понятие об иммунитете. Виды иммунитета. Неспецифические факторы защиты.

Инфекционная иммунология изучает закономерности иммунной системы по отношению к микробным агентам, специфические механизмы противомикробной… Под иммунитетом понимают совокупность биологических явлений, направленных на… Иммунитет может быть инфекционным, противоопухолевым, трансплантационным. Иммунитет обеспечивается работой иммунной…

Центральные и периферические органы иммунной системы. Клетки иммунной системы. Формы иммунного ответа.

Органы иммунной системы делят на: 1) первичные (центральные) – вилочковая железа, костный мозг – являются местами дифференцировки популяций… Вилочковая железа (тимус) играет ведущую роль в регуляции популяции… Дифференцируясь, лимфоциты благодаря освобождению гуморальных веществ получают антигенные маркеры.

Комплемент, его структура, функции, пути активации. Роль в иммунитете.

Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад ферментативных протеолитических реакций. Известны три пути активации… 9.4. Антигены: определение, основные свойства. Антигены бактериальной… Антиген – это биополимер органической природы, генетически чужеродный для макроорганизма, который при попадании в…

Антигены бактерий.

В зависимости от локализации в бактериальной клетке различают: 1) жгутиковые Н-АГ, локализуются в жгутиках у бактерий, основа его белок… 2) соматический О-АГ связан с клеточной стенкой бактерий. Его основу составляют ЛПС, по нему различают сероварианты…

Серологические реакции и их применение.

Иммунные реакции используют при диагностических и иммунологических исследованиях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические… В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации,… Реакция агглютинации – РА,при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий,…

Определения антител в сыворотке крови больного, например при бруцеллезе (реакция Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (р.Видаля), туляремии, коклюше;

Определения возбудителя, выделенного от больного;

Определения групп крови.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная Для определения у больного антител ставят в пробирках развернутую реакцию… Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации на…

Реакция иммунофлюоресценции РИФ (метод Кунса).

Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминисцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминисцирующей сывороткой светятся в виде каймы зеленого цвета. Данный метод является методом экспресс-диагностики для выявления антигенов микробов или антител.

Иммуноферментный метод (ИФА).Принцип метода следующий: на твердофазном носителе (поверхность лунок полистиролового планшета) фиксируется АГ возбудителя инфекции, антитела к которому необходимо выявить. Антиген, иммобилизованный на поверхности твердого носителя, называют иммуносорбентом. В ходе инкубации иммуносорбента с испытуемой сывороткой при наличие в ней АТ к данному АГ происходит их связывание в комплекс «антиген-антитело». Затем следует инкубация с меченными ферментом антителами к иммуноглобулинам человека (конъюгатом), в ходе которой на поверхности носителя происходит присоединение к комплексу антител, меченых ферментом ( в качестве фермента чаще всего используется пероксидаза хрена). Конъюгат получают на основе поликлональных антивидовых АТ, например кроличьи АТ или моноклональных АТ, направленных против человеческих иммуноглобулинов определенного класса M, G, A. В дальнейшем при добавлении субстрата происходит его взаимодействие с ферментом, в результате чего развивается цветная реакция, интенсивность которой зависит от количества связанных сывороточных АТ. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата применяют перекись водорода в сочетании с ортофенилдиамином. Результаты реакции оцениваются спектрофотометрически с выводом цифровых данных, что исключает субъективность оценки антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В, цитомегаловирусной инфекции, герпесной, токсоплазменной, а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ.

Иммунный блоттинг. В России в настоящее время стандартной процедурой лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител к ВИЧ с последующим подтверждением их специфичности в реакции иммунного блоттинга. Обнаружение антител к ВИЧ включает два этапа. На первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител (ИФА), на втором этапе методом иммунного блоттинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса, иммобилизованным на нитроцеллюлозную мембрану. Белки оболочки вируса ВИЧ1, обозначаемые как гликопротеины («gp» джи пи)с молекулярным весом, выраженным в килодальтонах: 160кд, 120кд, 41кд. У ВИЧ2 гликопротеины имеют вес 140 кд, 105кд, 36кд. Белки сердцевины (gag), обозначаемые как протеины ( «p» пи) у ВИЧ1 имеют молекулярный вес соответственно 55кд, 24кд, 17кд, а ВИЧ2 – 56кд, 26кд, 18кд. Результаты интерпретируются как положительные, в которых обнаруживаются антитела к 2 или 3 гликопротеинам ВИЧ. Отрицательными считаются сыворотки, в которых не обнаруживается антител ни к одному из белков.

Иммунодефицитные состояния. Аллергические реакции. Аутоиммунные процессы.

Иммунодефицитные состояния делят на: 1) врожденные (связаны с генетическим блоком развития иммунной системы в онтогенезе, предетерминированным… По уровню дефекта иммунной системы выделяют: 1) преимущественные дефекты… Основные принципы иммунодефицитных состояний: 1) инфекции, сопровождающиеся размножением возбудителя непосредственно в…

Иммунопрофилактика, иммунотерапия

Иммунопрофилактика направлена на создание активного или пассивного иммунитета к возбудителю инфекционной болезни, или его антигену с целью… Действующим началом в ИБП являются или антигены, полученные тем или иным… В настоящее время выделяют 5 групп иммунобиологических:

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Тема 10. Возбудители бактериальных кишечных инфекций.

Сальмонеллы

Сальмонеллы – грамотрицательные палочки средней величины, большинство из них подвижны, спор и капсул не образуют. Факультативные анаэробы. На… Биохимические свойства: к основным биохимическим особенностям относятся:… Антигенная структура. Сальмонеллы обладают соматическим термостабильным О-антигеном, по которому сальмонеллы разделяют…

Факторы патогенности.

2. фермент супероксиддисмутаза – антифагоцитарная активность сальмонелл; 3. эндотоксин – развитие лихорадки; 4. энтеротоксин – обладает гомологией с холерным энтеротоксином.

Шигеллы.

Шигеллы – грамотрицательные, неподвижные палочки, спор и капсул не образуют. На плотных питательных средах Плоскирева, Левина, Эндо образуют мелкие… Основные биохимические свойства: отсутствие газообразования при ферментации… Выживаемость во внешней среде. Шигеллы хорошо переносят высушивание, низкие температуры, при 600С погибают через 30…

Эшерихии.

Эшерихии –грамотрицательные палочки среднего размера, подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков. Не образуют спор, некоторые штаммы… Антигенная структура. E. Coliобладает сложной антигенной структурой. Имеет… Антигенная структура обозначается формулами серогруппы как О:Н, серовара – О:К:Н, например: О12:В6:Н2.

Холерный вибрион.

Возбудитель холеры относится к семейству Vibrionaceae, роду Vibrio, виду Vibrio cholerae. Холерный вибрион –небольшая изогнутая палочка, очень подвижная за счет… Биохимические свойства: сбраживает до кислоты глюкозу, сахарозу, не сбраживают арабинозу, рамнозу, дульцит. Для…

Иерсинии.

Иерсинии– прямые грамотрицательные палочки иногда приобретающие сферическую форму. Спор, капсул не образуют. Неподвижны при 370С, но ниже 300С… Биохимическая активность для Y. Pseudotuberculosis: 1) продукция уреазы; 2)… Антигенная структура. Иерсинии имеют О-, К- и Н-антигены. По О- антигену внутри вида делятся на серовары.

Тема 11. Пищевые токсикоинфекции и интоксикации бактериальной природы.

Общая характеристика и возбудители ПТИ.

кишечная палочка, протей, клебсиелла, энтеробактер, цитробактер, вибрионы не О1, клостридии, энтерококк. Патогенез ПТИ обусловлен массивным обсеменением пищевых продуктов… Пищевые интоксикации возникают при употреблении пищевых продуктов, содержащих экзотоксины микроорганизмов (экзотоксины…

Ботулизм.

Cl. Botulinum широко распространены в природе. Они обнаружены в органихме различных животных, рыб, ракообразных, в почве и воде. Заражение…

Микробиологическая диагностика.

Материал для исследования: кровь, промывные воды желудка, рвотные массы, испражнения, остатки пищевых продуктов. Методы лабораторной диагностики: основной – биологический- постановка реакции… Бактериологический – посев исследуемого материала на среду Кита-Тароцци с созданием анаэробных условий.

Тема 12. Возбудители гнойно-воспалительных заболеваний.

 

Возбудители ГВЗ относятся к различным группам микроорганизмов:

1) гноеродным коккам (стафилококк, стрептококк, менингококк, гонококк);

2) грамотрицательным палочкам (энтеробактерии, псевдомонады);

3) анаэробам, в том числе неклостридиальным.

 

Патогенные кокки.

Микробиология.Стафилококки относятся к семейству Micrococcaceae, роду Staphylococcus. Наибольшее значение в медицинской микробиологии имеют: St.… Дифференциально диагностическим признаком St. еpidermidis от St. saprophyticus…

Факторы патогенности.

2. энтеротоксины- вызывают ОКИ; 3. эксфолиативный токсин- пузырчатка новорожденных; 4. токсин синдрома токсического шока;

Микробиологическая диагностика.

Материал для исследования:

1. Гной из очагов поражения при гнойничковых заболеваниях кожи, фурункулах, флегмонах;

2. Спинномозговая жидкость (СМЖ);

3. Кровь при подозрениях на сепсис;

4. Слизистое отделяемое зева и носоглотки;

5. Мокрота;

6. Рвотные массы и промывные воды желудка.

 

Методы лабораторной диагностики.

Основные методы лабораторной диагностики: 1) бактериоскопический (приготовление мазка и окрашивание его по Граму); 2) бактериологический (посев исследуемого материала на питательные среды с дальнейшей идентификацией возбудителя).

ЛЕЧЕНИЕ.Антибиотики, стафилококковая плазма или гамма-глобулин, поливалентные стафилококковые бактериофаги. Для лечения хронических форм – анатоксин и аутовакцины.

ИММУНОПРОФИЛАКТИКА.Убитые вакцины для создания антитоксического иммунитета (стафилококковый анатоксин).

 

Стрептококкивызывают у человека заболевания дыхательных путей: пневмонию, скарлатину, фарингит), ЛОР-органов (ангину, отит, ларинготрахеит, синусит, хронический тонзиллит), сердечно-сосудистой системы (эндокардит). Стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных заболеваний кожи и подкожной клетчатки (рожа, флегмона, стрептодермия), инфекций центральной нервной системы (менингит), а также вызывают послеродовые и детские инфекции, воспалительные заболевания полости рта (кариес), сепсис, осложняет течение послеоперационных ран и ран военного времени, вызывая их нагноение. Острые стрептококковые инфекции осложняются и могут привести к хроническим заболеваниям (нефрит, эндокардит, ревматизм). Наибольшее значение в этиологии стрептококковых инфекций имеют: Str. рyogenes, Str. аgalactiae, Str. Рneumoniae, E. faecalis.

Микробиология.Стрептококки относятся к семейству Streptococcaceae, которое включает семь родов, шесть из которых патогенны для человека: Streptococcus, Enterococcus, Aerococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Lactococcus. Стрептококки сферические или слегка вытянутые (овоидные) грамположительные клетки, располагающиеся парами и цепочками различной длины. Неподвижны, спор не образуют, некоторые виды имеют капсулу. Например, пневмококки (возбудитель пневмоний) - клетки овальной формы, в мазках из клинического материала располагаются парами, каждая из которых окружена толстой капсулой. Для выделения стрептококков используют кровяной агар. На кровяном агаре стрептококки образуют мелкие прозрачные, полупрозрачные или непрозрачные колонии серовато-белого цвета. По виду гемолиза стрептококки можно разделить на 3 группы: 1) бета-гемолитические стрептококки - вызывают полный лизис эритроцитов вокруг образованных колоний (Str. рyogenes, Str. аgalactiae), 2) альфа-гемолитические стрептококки дающие гемолиз в виде полупрозрачной зоны зеленоватого оттенка, обусловленной превращением гемоглобина в метгемоглобин. Этот тип колоний характерин для стрептококков полости рта (Str. salivanus, Str. mutans, Str. оralis), 3) негемолитические гамма- стрептококки. Эти микроорганизмы обладают слабой вирулентностью и не имеют практического значения. На жидких питательных средах рост различных видов стрептококков имеет свои особенности. Для пиогенного стрептококка характерен придонно-пристеночный рост с образованием мелкозернистого осадка и сохранением полной прозрачности среды. Пневмококки дают придонный рост в виде пушистого рыхлого осадка с сохранением полной прозрачности. Str. аgalactiae вызывает интенсивное помутнение бульона с образованием небольшого осадка.

Факторы патогенности.

2. М-белок (нарушает процессы фагоцитоза- из-за сходства в строении с АГ сердечной и почечной ткани становится причиной аутоиммунных процессов,… 3. Fc-белок обладает антикомплементарным и антифагоцитарным действием,… 4. токсины: стрептолизин О обладает гемолитическим и кардиотоксическим действием; стрептолизин S обладает…

Грамотрицательные бактерии.

Для культивирования требуются питательные среды, содержащие кровь (кровяной агар). Биохимическая активность выражена слабо. Расщепляют в основном… Антигенная структура: 1) соматический белковый О-антиген; 2) капсульный… Факторы патогенности: 1) эндотоксин; 2) капсульный полисахарид, обладающий антифагоцитарной активностью. Экзотоксин не…

Раневые анаэробные клостридиальные и неклостридиальные инфекции.

Клостридии–это грамположительные палочки, которые образуют овальные или круглые эндоспоры, расположенные или центрально, или субтерминально, или… Газовая гангрена – раневая инфекция, характеризующаяся крепитацией окружающих… К возбудителям газовой гангрены относятся: Cl. Perfringens, Cl. Novyi, Cl. Septicum, реже Cl. Histolyticum, Cl.…

Неклостридиальные анаэробы.

Включают 17 родов палочковидных и 3 рода кокковидных бактерий. Большинство их входит в состав микрофлоры полости рта, верхних отделов дыхательных… Неклостридиальные анаэробы относятся к отделу Gracilicutes, семейству… Род Bacteroides – это грамотрицательные палочки, неподвижны, спор не образуют, строгие анаэробы. Бактероиды…

Тема 13. Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций.

Коринебактерии.

Коринебактерии требовательны к питательным средам. Для их культивирования применяются сывороточные среды или среды с добавлением крови. Для… Биохимические свойства: ферментирует глюкозу и мальтозу с образованием… По биохимическим свойствам Коринебактерии подразделяются на четыре биовара: gravis, mitis, intermedius, belfanti.

Бордетеллы.

Возбудитель коклюша впервые был выделен из мокроты больного ребенка в 1906 году бельгийским бактериологом Ж.Борде и французским ученым О.Жангу,… Для выделения бордетелл используют сложные питательные среды с добавлением… Биохимическая активность низкая. Бордетеллы расщепляют глюкозу и лактозу до кислоты без газа.

Менингококки.

Neisseria meningitidis является возбудителем менингококковой инфекции. Это диплококки бобовидной формы. Спор не образуют, неподвижны, в организме… Биохимически малоактивны, ферментируют только глюкозу и мальтозу, образуя… Антигенная структура: Менингококк имеет 7 антигенных типов, которые обозначаются буквами ла­тинского алфавита: А, В,…

Микобактерии.

M. Tuberculosis – аэроб, медленно растет (до 30 дней), требователен к питательным средам. Факторы роста – глицерин, аминокислоты. Стимулятор роста –… Биохимические свойства: туберкулезная палочка образует никотиновую кислоту… Факторы патогенности: 1) миколовые кислоты, 2) корд-фактор; 3) сульфатиды; 4) микозиды; 5) липоарабиноманан.

Легионеллы.

Болезнь получила название в связи со вспышкой среди участников съезда организации «Американский легион» в 1976г. в г. Филадельфии (США). Legionella pneumophila – это грамотрицательные палочки, подвижны, спор не… Требовательны к питательным средам. В состав среды входят пирофосфат железа и активированный уголь. Через 72 часа…

Тема 14. Возбудители заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП).

Хламидии.

семейству Chlamydaceae, роду Chlamydia виду C. Trachomatis – возбудитель трахомы, урогенитального хламидиоза,… и роду Chlamydophila,

Возбудитель сифилиса.

Возбудитель заболевания относится к порядку Spirochaetales роду Treponema

Гонококки.

Возбудитель заболевания относится к аэробным грамотрицательным коккам, роду Neisseria,

Тема 15. Возбудители риккетсиозов.

Эпидемиология. Резервуаром и переносчиком риккетсиозов являются клещи, вши и блохи. Риккетсии выделяются с фекалиями переносчиков в окружающую… Профилактика. Неспецифические меры прфилактики риккетсиозов сводятся к… Эпидемический сыпной тиф и болезнь Бриля-Цинссера (рецедив сыпного тифа)- возбудитель R. Prowazekii.Природный…

Тема 16. Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций.

  Выделяют 2 группы зоонозов:   инфекции, передаваемые от домашних и синантропных животных (сибирская язва, бруцеллез, сап, миелоидоз); …

Франциселлы.

Туляремия - природно-очаговое заболевание человека и животных, которое характеризуется лихорадкой, интоксикацией и поражением лимфатических узлов.

Возбудитель туляремии – это мелкие грамотрицательные коккобактерии, спор не образуют, неподвижны, образуют капсулу, факультативные анаэробы. Не… Факторы патогенности: образование капсулы, эндотоксина, нейраминидазы. Эпидемиология: Источниками инфекции являются водяные полевки, зайцы, хомяки, ондатры, кроты, мышевидные грызуны. Для…

Бруцеллы.

На протяжении последнего десятилетия на территории РФ регистрируется от 400 до 700 случаев заболеваемости с впервые диагностированным бруцеллезом.… Бруцеллы – это мелкие грамотрицательные микроорганизмы шаровидной, овоидной… Возбудитель бруцеллеза относится к роду Brucella, который состоит из 6 самомтоятельных видов:

Возбудитель сибирской язвы.

Возбудителем сибирской язвы является Bacillus anthracis.Сибиреязвенные палочки- это крупные грамположительные палочки с обрубленными концами,… Факторы патогенности. 1) капсула; 2) экзотоксин Эпидемиология. Источником инфекции являются больные животные, чаще всего КРС, овцы, козы, лошади, олени, буйволы.…

Возбудитель чумы.

Возбудитель заболевания – Yersinia pestis, который относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia. Это грамотрицательная, неподвижная… Биохимические свойства: не расщепляет мочевину, не ферментирует рамнозу,… Факторы патогенности. 1) ферменты (фибринолизин, плазмокоагулаза, пестицин, гемолизин); 2) токсины – «мышиный токсин»;…

Лептоспиры.

Возбудитель заболевания–L interrhogans относится к семейству Leptospiraceae роду Leptospira и включает более 200 сероваров. Наиболее распространенные возбудители лептоспирозов, циркулирующие в природных…   Геномовид Серогруппа Серовар Основные хозяева лептоспир L.…

Микробиологическая диагностика.

В период лептоспиремии (1-я неделя заболевания) для обнаружения лептоспир можно использовать микроскопию цитратной крови, посев крови,… С конца 1-й, начала 2-й недели в крови больных появляются специфические… Начиная со 2-й недели, исследуют ликвор, с 3-й недели – мочу. В случае летальных исходов – паренхиматозные органы на…

Тема 17. Патогенные простейшие.

Плазмодии малярии.

Этиология. Возбудители малярии относятся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa (споровики), роду Plasmodium. У людей малярию вызывают 4 вида… P. vivax – возбудитель трехдневной малярии P. ovale – возбудитель малярии типа трехдневной

Токсоплазмы.

Этиология. Возбудитель заболевания – Toxoplasma gondii, которая является облигатным внутриклеточным паразитом и существует в трех формах: тахизоит… Трофозоиты токсоплазм имеют характерную форму в виде полулуний, долек… Цисты токсоплазм – образования, имеющие собственную плотную оболочку, размером 30-100нм в диаметре, содержат до…

Лейшмании.

Этиология. Лейшмании в пораженных тканях (клетках) представляют собой круглые или овальные образования, размером от 2-5мкм. Протоплазма окрашивается… Лейшмании относятся к типу Sarcomastigophora, подтипу Mastigophora… Эпидемиология. По данным Всемирной организации здравоохранения лейшманиозы распространены в 88 странах мира, в 32…

Возбудитель амебиаза.

Микробиология. Возбудителем амебиаза является дизинтерийная амеба – Entamoeba histolytica, которая относится к типу Sarcomastigophorae, подтипу… Под влиянием ряда факторов (понижение сопротивляемости человеческого организма… Размеры тканевой формы варьируют от 15-25 до 45 мкм в диаметре (в среднем 23мкм). При движении амеба может…

Лямблии.

  Эпидемиология. Основным источником инвазии является человек, зараженный… Клиника. Клинически выраженная инвазия чаще всего проявляется симптомами поражения желудочно-кишечного тракта.…

Тема 18. Патогенные грибы.

Размножениегрибов происходит половым и бесполым (вегетативным) способами. Половое размножение грибов происходит с образованием гамет, половых спор.… Культивирование грибов производится в аэробных условиях при температуре… Факторы патогенности. Некоторые виды грибов обладают способностью продуцировать экзотоксины: афлотоксины, липотоксол,…

Микробиологическая диагностика.

1. кожные чешуйки, волосы, ногти 2. кровь 3. мокрота

ЧАСТНАЯ ВИРУСОЛОГИЯ.

Тема 19. Возбудители ОРВИ.

Вирусы гриппа.

Вирусы гриппа А, В и С отличаются друг от друга по типоспецифическому антигену, связанному с белками М и NР. Более узкую специфичность вируса типа А… Первоначально возбудитель реплицируется в эпителии верхних отделов дыхательных… Основные симптомы включают в себя быстрое повышение температуры тела с сопотствующими миалгиями, насморком, кашлем,…

Парагрипп. РС-вирусы.

Вирус парагриппа человека относится к роду парамиксовирус. На основании различной антигенной структуры HN, F, NР- белков вирусов парагриппа человека… Возбудитель репродуцируется в эпителии верхних отделов дыхательных путей,… Клинические проявления у взрослых чаще протекают в форме катаров верхних отделов дыхательных путей…

Аденовирусы.

Нуклеокапсид представляет собой сферические частицы диаметром 70-90нм. Капсид состоит из 252 капсомеров, построен по икосаэдрическому типу… Антигенная структура: 1) поверхностные антигены структурных белков (видо- и типоспецифичные);

Риновирусы.

Основной путь передачи – воздушно-капельный, резеруар – больной человек. Риновирусы локализуются в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа с… После перенесенного заболевания остается непродолжительный иммунитет, который эффективен только против гомологичного…

Реовирусы.

Основной путь передачи – воздушно-капельный. Реовирусы первично репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой оболочки… Лабораторная диагностика: 1) выделение вируса в культуре клеток и у новорожденных мышей; 2) идентификация вируса в…

Тема 20. Возбудители вирусных воздушно-капельных инфекций.

Вирусы кори и паротита.

Вирус эпидемического паротита относится к роду парамиксовирусов. Вирусная инфекция характеризуется преимущественным поражением околоушных слюнных… Антигенная структура: 1) внутренний NР- протеин; 2) поверхностные HN- и F-… Первоначально возбудитель репродуцируется в эпителии носоглотки, затем проникает в кровоток и в период вирусемии…

Вирус герпеса

· альфагерпесвирусы (вирус простого герпеса тип 1, тип 2, вирус ветряной оспы – опоясывающего герпеса). · бетагерпесвирусы (цитомегаловирус, герпес вирус человека тип 6, тип 7). · гаммагерпесвирусы (вирус Эпштейна-Барр)

Лабораторная диагностика ЦМВИ.

 

1. Микроскопический метод исследования окрашенных препаратов мочи, слюны, ликвора или секционного материала для выявления в них специфически измененных («гигантских клеток»). Окраску препаратов производят азур-эозином, гематоксилин-эозином или по Папенгейму.
2. Вирусологичесикй метод основан на заражении исследуемым материалом монослойных культур фибробластов эмбриона человека и диплоидных культур клеток легких человека с последующим микроскопическим определением цитопатогенного действия вируса на клетки. Наличие вируса в культуре не дифференцирует первичную или рецедивирующую инфекцию, хотя подтверждает вирусоносительство.
3. Молекулярно-генетические методы (ПЦР) – это высокочувствительные и высокоспецифичные методы исследования при которых можно выявлять как активный, так и латентно присутствующий в материале вирус.
4. Серологические методы:

Выявление вирусных антигенов –иммунофлюоресцентный метод. Позволяет выявить вирусные АГ в слюне, моче, ликворе, секционном материале. Его специфичность составляет 60-70%.

Выявление специфических антител (Ig M- и Ig G) имеет смысл проводить при диагностике первичного инфицирования или врожденной инфекции. Выявление Ig M- антител в крови плода, указывает на внутриутробное инфицирование.

Герпетическая инфекция или простой герпес – это инфекция, которая вызывается вирусами простого герпеса 1 и 2 типов и характеризуется тегментальными поражениями, т.е. поражениями кожи и слизистых оболчек, поражением центральной нервной системы, а также других систем организма. Ее проявления часто ассоциированы с иммуносупрессией, а у иммунокомпрометированных лиц она может иметь диссеминированное, септическое течение. Особое значение имеет то, что герпетическая инфекция способна вызывать врожденную патологию плода и заболевания у новорожденных.

Этиология. Возбудители герпетической инфекции – Herpes simplex virus type 1 и 2 ( HSV-1,2 или ВПГ-1,2) относятся к роду Simplexvirus, подсемейству Alphaherpesvirinae, семейству Herpesviridae.

ВПГ – 1 чаще обусловливает поражение респираторных органов, а ВПГ-2 – развитие генетального герпеса и генерализованной инфекции у новорожденных.

Вирус имеет линейную двуцепочечную ДНК упакованную в капсид, состоящий из 162 капсомеров. Диаметр капсида составляет 100-110 нм. Вокруг капсида находится зона, непробиваемая для лучей электронного микроскопа, называемая тегумент, и все это заключено в гликопротеиновую оболочку. Основные поверхностные гликопротеиды представлены белками gВ, gС, gД, gЕ, gG. Гликопротеиды вируса ответственны за прикрепление и проникновение вирусной частицы внутрь клетки и индукцию образования вируснейтрализующих антител.

Эпидемиология. Источником заражения являются люди, инфицированные ВПГ, независимо от того, протекает у них инфекция бессимптомно или манифестно. Основными механизмами заражения являются перкутанный и аспирационный. Перкутанный механизм заражения реализуется в естественных и искусственных условиях. Заражение восприимчивого человека происходит при непосредственном контакте с источником инфекции (орально-оральный, сексуально-трансмиссивный пути) или опосредованно – через контаминированную вирусом посуду, полотенца, зубные щетки, игрушки. Инфекция может передаваться вертикально – от матери к плоду. Аспирационный (аэрогенный) механизм заражения реализуется воздушно-капельным путем. Искусственный путь передачи ВПГ – парентерально. Фактором передачи инфекции может быть консервированная кровь, трансплантанты органов, тканей, сперма. В медицинских учреждениях возможно также заражение при использовании контаминированного вирусами инструментария, применяющегося в гинекологической, стоматологической, отоларингологической, офтальмологической, дерматологической практике.

Клиника. Различают приобретенную (первичную и вторичную) инфекцию и врожденную. Перовичный простой герпес возникает при первом контакте человека с вирусом. Инкубационный период длится от 2 до 14 дней. Первичный простой герпес наблюдается преимущественно у детей в возрасте от 6 мес. До 5 лет и значительно реже – у взрослых. У 80-90% первично инфицированных детей заболевание протекает в бессимптомной форме и только у 10-20 % зараженных имеются клинические проявления (манифестная форма). Наиболее частыми формами первичного герпеса является острое респираторное заболевание и острый герпетический стоматит (гингивостоматит). Первичный герпес может проявляться различными поражениями кожи, конъюнктивы или роговицы глаза. Первичный генитальный герпес возникает в более позднем возрасте с началом сексуальной жизни.

Вторичный простой герпес возникает в результате реактивации имеющегося в организме вируса.

Первичный и вторичный герпес имеют одинаковую локализацию поражения и формы болезни:

Тегментальный простой герпес. Типичными являются пузырьковые высыпания, чаще локализуются в области красной каймы губ и крыльев носа. Могут бять поражения кожи: лба, шеи, туловища, конечностей. Умногих пациентов высыпаниям предшествуют чувство жжения, кожный зуд, гиперемия, отек. Затем появляются папулы, превращающиеся в везикулы, наполненные серозным содержимым.

Атипичные формы простого герпеса имеют многообразные проявления. Резкий отек подкожной клетчатки или гиперемия, что может привести к диагностическим ошибкам и даже неправильному диагнозу «флегмона» с последующим хирургическим вмешательством.

Иногда высыпания при простом герпесе локализуются по ходу нервных стволов, напоминая опоясывающий лишай. Это зостериформный простой герпес, чаще встречающийся у лиц с иммуносупрессией.

• Герпетиформная экзема встречается у детей грудного или более старшего возраста. Впервые эту форму болезни описал в 1887г. Капоши, поэтому она носит название «экзема Капоши».
• Язвенно-некротическая форма простого герпеса встречается при ВИЧ-инфекции в стадии СПИДа, а также у онкологичесикх, гематологических пациентов на фоне лучевой, кортикостероидной, цитостатической терапии.
• Геморрагическая форма простого герпеса – везикулы имеют кровянистое содержимое, что наблюдается у пациентов с нарушением системы гемостаза различного генеза.
• Герпетические поражения слизистых обололчек полости рта
• Герпетические поражения слизистых оболочек верхних дыхательных путей
• Герпетические поражения аноректальной области
• Герпетические поражения глаз (офтальмогерпес)

Герпетические поражения половых органов (генитальный герпес) протекает тяжело. Развиваются отек и гиперемия наружных половых органов, затем появляются везикулярные высыпания на половом члене, в области вульвы, сопровождается регионарным лимфаденитом. Везикулы быстро вскрываются, образуя эрозивные, эрозивно-язвенные поверхности. Все это сопровождается чувством жжения, зудом, мокнутием, болезненностью, делает невозможными половые контакты, что приводит к развитию невротических состояний. Рецидивирующий генитальный герпес сопровождается регионарным лимфаденитом, иногда развивается лимфостаз и как результат – слоновость половых органов. У женщин рецидивирующий герпес может способствовать развитию карциномы шейки матки.

Висцеральный простой герпес. Наиболее часто в патологический процесс вовлекается нервная система, в результате чего возникают серозный менингит, энцефалит или менингоэнцефалит. На втором месте по частоте висцеральных поражений стоит печень. Развивающийся герпетический гепатит имеет общие клинико-лабораторные признаки с гепатитом В, С. Герпетическая пневмония наблюдается у лиц с выраженными иммунодефицитными состояниями, в т.ч. с ВИЧ/СПИДом.

Диссеминированный простой герпес (герпетичесикй сепсис) встречается только у лиц с тяжелым иммунодефицитом и у детей до 1 мес., относится к СПИД-индикаирным болезням. Летальность составляет около 80%.

Простой герпес у беременных. Повышается вероятность самопроизвольного аборта и преждевременных родов. Особенно неблагоприятно воздействие первичного простого герпеса на развивающуюся беременность и плод при ее возникновении в первом триместре беременности. При восходящем пути инфицирования (из шейки матки) нередко наблюдается многоводие, невынашивание беременности, задержка внутриутробного развития, отечный синдром.

Врожденный простой герпес может протекать в виде следующих форм:

• Генерализованная (диссеминированная) форма с церебральными и висцеральными повреждениями.
• Локализованная форма: поражение кожи, слизистых полости рта, глаз.
• Висцеральная (поражение легких, печени, селезенки, надпочечников).
• Поражение нервной системы (транзиторные неврологические изменения, кистозные полости в белом веществе лобных и теменных долей, субэпендимальные кисты, энцефалит, менингоэнцефалит).

Установлено, что инфицирование в 1 триместре беременности приводит к развитию у плода микро-, гидроцефалии, пороков сердца, желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы, скелета, катаракты, глухоты. Инфицирование во 2 и 3 триместрах вызывает у плода гепатоспленомегалию, анемию, желтуху, гипотрофию, пневмонию, менингоэнцефалит, сепсис. 50% клинически выраженной перинатальной герпетической инфекции протекают в диссеминированной форме, 30% - в первичной неврологической форме (менингоэнцефалит) и 20% - в виде поражений кожи и слизистых.

Лабораторная диагностика. Материалом для лабораторного исследования при герпетической инфекции в зависимости от клинической формы являются: соскоб конъюнктивы, слезная жидкость, соскоб со слизистой половых органов, вагинальный секрет, жидкость из элементов поражения, соскобы или препараты отпечатки со слизистой полости рта, слюна, ликвор, кровь, биоптаты мозга, бронхиальный аспират, глоточные смывы, назофарингиальный секрет, фекалии.

В лабораторной диагностике используются следующие методы:

· Вирусологический – заражение культуры клеток исследуемым материалом и выявление вируса по цитопатогенному действию на клетки. Данный метод трудоемок, длителен, требует специального оборудования. Результаты вирусологического исследования требуют обязательного подтверждения другими методами.

· Микроскопический (цитологическая диагностика). Метод является неспецифическим, чувствительность невелика (50%), исследование окрашенных препаратов не позволяет проводить дифференцировку инфекций, вызванных ВПГ и вирусом ветряной оспы, т.к. их морфология одинакова.

· Молекулярно-генетический (ПЦР-диагностика) – с помощью ПЦР может быть выявлен вирус как активный, так и латентно присутствующий в материале на уровне чувствительности одного вирусного генома на миллион клеток. Положительный результат ПЦР в крови, моче, ликворе говорит об активной инфекции. Однако, возможности широкого практического использования ПЦР-диагностики в лабораторных исследованиях существенно ограничивает высокая стоимость соответствующих наборов и необходимого для проведения исследований оборудования.

· Серологические методы: на обнаружение вирусных антигенов: 1) метод флюоресцирующих антител (МФА); 2) иммуноферментный анализ; на определение антител: 1) реакция нейтрализации, 2) реакция торможения гемагглютинации, реакция пассивной гемагглютинации, ИФА.

 

Лечение. Терапия больных простым герпесом индивидуальна и зависит от формы инфекции, тяжести, частоты рецедивов. Она включает этиотропное, патогенетическое и симптоматическое направления. В этиотропной терапии используются: ацикловир (зовиракс, виролекс), валацикловир (валтрекс), фамцикловир (фамвир), рибавирин (виразол, рибамидил), ганцикловир (цимевен), фоскарнет (фоскавир). К перспективным средствам лечения герпетической инфекции, обладающим высокой противовирусной активностью относятся также пенцикловир, флацитобин, цидофовир, зонавир, лобукавир, соривудин, бривудин, узевир и адефовир. Патогенетическая терапия направлена на нормализацию функции иммунной системы организма, в том числе на активацию системы интерфероновой защиты, и проводится под контролем иммунограммы. К числу натуральных интерферонов (ИФН) относятся: альфаферон, вэлферон, эгиферон. Используемые в настоящее время в лечении герпетической инфекции индукторы интерферона можно условно разделить на 3 большие группы: 1) препараты из хлопчатника (гозалидон, кагоцел, мегасин, рогасин, саврац); 2) препараты двунитчатой РНК или содержащие двунитчатые нуклеотидные последовательности: ларифан, полигуацил, полудан, ридостин, амплиген; 3) прочие: амиксин, камедон (неовир), циклоферон, гепон. В ранний период рецидива показано введение иммуноглобулинов, содержащих повышенный титр антител к герпетическим вирусам. Для лечения часто рецидивирующего простого герпеса применяются также инактивированные противогерпетические вакцины.

Ветряная оспа. Это типичная герпес-вирусная инфекция, вызываемая алфагерпесвирусом. Клинически проявляется появлением пузырьков на коже по ходу ветвей соответствующих нервов. Заболевание протекает тяжело, но быстро наступает выздоровление.

После перенесенной инфекции остается пожизненный иммунитет. Однако возможны рецедивы болезни, связанные с персистенцией вируса в нервных ганглиях при снижении защитных сил организма.

Ветряная оспа чаще поражает детей в возрасте до 10 лет. Источником инфекции являются больные люди. Возбудитель передается воздушно-капельным путем и локализуется первично в клетках верхних дыхательных путей, затем он попадает в кровь и разносится по организму, что приводит к возникновению заболевания. При ветряной оспе поражаются кожные покровы, паренхиматозные органы, головной мозг. Эпителиальные клетки подвергаются дистрофии и гибнут. В пораженных клетках можно обнаружить внутриядерные эозинофильные включения. Некроз эпителиальных клеток и накопление межтканевой жидкости обусловливает образование пузырьков – везикул. При ветряной оспе сыпь на коже полиморфная, пузырьки однокамерные, что отличает ее от везикул при натуральной оспе.

После инкубационного периода продолжительностью 2-3 недели у больных отмечаются повышение температуры тела, озноб, общая вялость. За 1-2 дня до истинного высыпания довольно часто появляется скарлатиноподобная или кореподобная сыпь, которая исчезает через несколько часов или 1-2 дня. Для ветряной оспы характерно образование во рту и зеве пузырьков, затем язвочек. Поражение ветряной оспой женщин в первые 3 мес. беременности может привести к развитию различных аномалий у плода. Заболевание ветряной оспой в последующие месяцы беременности не приводит к тератогенному эффекту, но ребенок может родиться с сыпью на теле или она возникает в первые дни после рождения.

Опоясывающий герпес в основном наблюдается у взрослых. Считают, что причиной его является активация под действием различных стрессорных факторов возбудителя, находящегося в латентном состоянии. Активизированный вирус по нервным стволам достигает кожи, в клетках которой он репродуцируется, вызывая развитие везикул, таких же, как и при ветряной оспе, но локализованных на ограниченной поверхности, чаще по ходу межреберных нервов. Заболевание сопровождается жжением, зудом и невралгическими болями, иногда повышением температуры. Пузырьки наполнены прозрачной жидкостью. Высыпания полиморфные. В ряде случаев сыпь сливается и напоминает сплошную ленту.

Вирус краснухи.

Этиология. Возбудитель краснухи – РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Rubivirus семейства Togaviridae. Вирион тогавирусов сферической формы,… Эпидемиология. Источником инфекции являются больные различными формами… Клиника. Приобретенная краснуха протекает циклично, как острое инфекционное заболевание. Инкубационный период 11-24…

Тема 21. Поксивирусы

Возбудитель натуральной оспы.

Вирус натуральной оспы относится к семейству поксивирусов, роду ортопоксивирусы. Вирион вируса имеет овоидную форму. Это один из самых крупных… Антигенная структура: 1) нуклеопротеиновый Источником инфекции является больной человек. Заражение оспой происходит воздушно-капельным и воздушно-пылевым путем…

Тема 22. Энтеровирусные инфекции.

Вирус полиомиелита.

Вирус относится к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов. Это семейство относится к безоболочечным вирусам, содержащим однонитевую плюс РНК.… Вирусы кислотоустойчивы и относительно стабильны при низких значениях рН, что… Антигенная структура полиовирусов стабильна, возможны лишь редкие серологические вариации.

ЕСНО-вирусы. Вирусы Коксаки.

ЕСНО вирусы выделены в особую группу кишечных вирусов вследствие полного отсутствия патогенного действия на лабораторных животных. Выделяют 34… Групповой специфический антиген отсутствует. Некоторые типоспецифические… Заражение ЕСНО-вирусами происходит фекально-оральным путем, реже ингаляционно.

Тема 23. Ретровирусы.

Возбудитель ВИЧ-инфекции.

Этиология возбудителя.Вирус иммунодефицита человека относится к РНК-содержащим вирусам и принадлежит к семейству ретровирусов, роду лентивирусов. … Сем-во: Retroviridae, род Lentivirus Вирусная частица имеет сферическую форму, диаметр которой составляет 100 нм. Оболочка вируса состоит из двойного слоя…

Факторы патогенности.

2. поражает не только Т-хелперы, но и В-лимфоциты, макрофаги, лейкоциты, клетки Лангерганса и др. 3. снижается число Т-4-лимфоцитов, а также соотношение Т-4/ Т-8.  

Лабораторная диагностика.

Материалом для исследования является сыворотка крови больного ВИЧ-инфекцией. Забор крови производится из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 3-5 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь. Цельную кровь нельзя хранить более 12 часов при комнатной температуре и более суток в холодильнике, так как гемолиз эритроцитов может повлиять на результаты анализа. Сыворотка отделяется центрифугированием и переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку и в таком виде она может храниться до 7 дней при температуре 4-8⁰С.

Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3 месяцев после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев от момента заражения, и у 0,5-1% - в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител – 2 недели от момента заражения.

Обнаружение антител к ВИЧ включает два этапа. На первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа. На втором этапе методом иммунного блоттинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

Неспецифические лабораторные признаки ВИЧ-инфекции.

При ВИЧ-инфекции могут наблюдаться такие нарушения, как снижение количества СД4-лимфоцитов, увеличение процентного содержания СД8-лимфоцитов, инверсия соотношения СД4/СД8 (если его значение меньше 1), повышение уровня бета-2-микроглобина, неоптерина, возрастание количества иммуноглобулинов и другие.

К основным принципам терапии ВИЧ-инфекции можно отнести:

· необходимость создания охранительного психологического режима

· своевременное начало эффективной этиотропной (противоретровирусной) терапии и профилактики вторичных заболеваний

· тщательный выбор лекарственных препаратов с подбором необходимого минимума

· своевременное лечение вторичных заболеваний, для чего необходима их ранняя диагностика.

1. Информация о неизлечимости ВИЧ-инфекции и ее фатальном прогнозе вызывает у инфицированного ВИЧ тяжелые эмоциональные реакции, связанные с внезапным осознанием неизбежности смерти.

Наиболее доступной формой психологической помощи является индивидуальная беседа, а также семейная психотерапия. В случаях, когда больной не соглашается в этих вопросах, применяется рациональная психотерапия. Существенной чертой этого метода является воздействие логическим убеждением.

2. Одной из особенностей ВИЧ-инфекции является полиэтиологичность развивающихся при ней вторичных заболеваний и полиорганность поражений. К основным направлениям химиотерапии больных ВИЧ-инфекцией можно отнести лечение противоретровирусными препаратами, химиопрофилактику и лечение вторичных заболеваний.

Лабораторными показаниями к проведению противоретровирусной терапии является снижение уровня СД4-лимфоцитов менее 0,3х10⁹/л или повышение концентрации РНК ВИЧ в крови, так называемая «вирусная нагрузка» более 60000 копий в мл.

Применение отдельных схем противоретровирусной терапии:

Монотерапия может проводиться по следующей схеме: тимазид (АЗТ), капсулы по 0,1г по 2 капсулы 3 раза в день (0,6г в сутки). Фосфазид (Ф-АЗТ), таблетки по 0,2г, по 2 таблетки 2 раза в день (0,8г в сутки) или по 1 таблетке (0,2г) 3 раза в день (суточной дозе 0,6г).

Битерапия - применение одного из препаратов ингибиторов обратной транскриптазы производных тимидина (азидотимидин (АЗТ), фосфазид (Ф-АЗТ), ставудин (d4Т) и одного из препаратов производных аденина (диданозин (dd I), ламивудин (3ТС), зальцитабин (ddС), абакавир).

Высокоинтенсивная противовирусная терапия – использование препаратов из группы ингибиторов протеазы и ингибиторов обратной транскриптазы: фосфазид по 0,4г 2 раза в сутки, диданозин по 0,2г 2 раза в сутки, невирапин по 0,2г 2 раза в сутки.

Профилактика. Специфическая профилактика не разработана, но ведутся интенсивные работы по созданию профилактической вакцины.

В настоящее время профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям, а именно: к механической защите от инфицирования с помощью презервативов, к пользованию одноразовыми шприцами, иглами, медицинскими инструментами, системами для переливания крови. Борьба с проституцией, наркоманией, гомосексуализмом, безнравственностью.

 

Тема 24. Арбовирусные инфекции.

Арбовирусные инфекции – природноочаговые инфекции, циркулирующие на определенной территории среди низших и высших позвоночных животных, птиц и членистоногих (комаров, клещей, москитов). Резервуаром вируса в природе являются низшие и высшие позвоночные животные и птицы. Членистоногие являются переносчиками вируса.

Рабдовирусы.

Этиология. Относится к семейству рабдовирусов, роду лиссавирус. Вирионы имеют форму цилиндра с полукруглым и плоским концами (форма пули), размер… Вирионы имеют форму цилиндра с полукруглым и плоским концами (форма пули),… Антигенная структура: 1) нуклеопротеид – группоспецифический антиген; 2) гликопротеид внешней оболочки –…

Флавивирусы.

Этиология. Вирус клещевого энцефалита относится к роду флавивирусы. Это сложные РНК геномные вирусы сферической формы, их диаметр 40-60 нм. Геном… Антигенная структура: 1) структурные белки (V) ответственны за… Эпидемиология. Территория, на которой регистрируется заболеваемость клещевым энцефалитом, совпадает в основном с…

Хантавирусы.

Этиология. Вирус ГЛПС относится к семейству буньявирусы, роду хантавирусы. Вирионы имеют овальную или сферическую форму, диаметр 80-120нм. Это… Эпидемиология. Источником инфекции при ГЛПС являются грызуны (рыжая, красная и… Возбудитель проникает в организм человека через кожные покровы, слизистые оболочки дыхательных путей, органов…

Тема 25. Возбудители вирусных гепатитов.

Вирусные гепатиты – группа инфекционных заболеваний, вызванных гепатотропными вирусами (А, В, С, Д, Е, G, TTV), при которых воспалительные и… Пять вирусов (А, В, С, Д, Е), принадлежащих к различным семействам, способны… Хронические вирусные гепатиты, как правило, малосимптомны и нередко впервые выявляются на стадии цирроза печени.…

Вирус гепатита А.

Антигенная структура: имеет один вирусспецифический антиген белковой природы. Вирус устойчив к действию физичесикх и химических факторов. Основной механизм передачи вируса – фекально-оральный. Больной выделяет возбудитель в течение 2-3 недель до начала…

Вирус гепатита В

Заражение происходит при инъекциях инфицированной крови или препаратов крови; через загрязненные медецинские инструменты; половым путем и… Место первичной репликации вируса неизвестно, размножение в гепатоцитах… Клинические проявляния варьируют от бессимптомной и безжелтушной форм до тяжелой дегенерации печени.

Различные сочетания серологических маркеров инфицирования вирусом

Гепатита В и их интерпретация.

Лечение: целью лечения больных является увеличение продолжительности и улучшения качества жизни пациентов. До 1998г. единственным препаратом,… Специфическая профилактика: 1) пассивная иммунизация – вводят специфический…

Вирус гепатита С.

Вирус гепатита С характеризуется антигенной изменчивостью, имеются семь основных вариантов вируса. Источником инфекции являются больные острым и хроническим гепатитом С и… Характерны преобладание безжелтушных форм и частый переход в хроническую форму заболевания. Вирус является одним из…

Тема 26. Папилломавирусная инфекция.

Резкое снижение иммунитета, наблюдаемое при СПИДе, при лечении цитотоксическими препаратами, сопровождается реактивацией латентной папилломавирусной… Эпидемиология. Характер половых связей, как женщин, так и мужчин является… Клиника. Наиболее часто ВПЧ-инфекция протекает субклинически, обычно на фоне различных гинекологических заболеваний,…