Партатаминотрансферазы) в сыворотке крови по Райтману и Френкелю
Партатаминотрансферазы) в сыворотке крови по Райтману и Френкелю - раздел Химия, РАЗДЕЛ 5 БИОХИМИЯ БЕЛКОВ И НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ. БЕЛКИ-1. ПЕРЕВАРИВАНИЕ И ВСАСЫВАНИЕ БЕЛКОВ
Принцип Метода. В Результате Переаминирования, ...
Принцип метода. В результате переаминирования,происходящего поддействием АСТ, образуется щавелевоуксусная кислота. Щавелевоуксусная кислота спонтанно декарбоксилируется в пировиноградную. При добавлении 2,4-динитрофенилгидразина в щелочной среде образуется гидразон пирови-ноградной кислоты красно-коричневого цвета, интенсивность окраски кото-рого определяется колориметрически (см. уравнения).
a-кетоглутарат
глутамат
NH2 O
АсАТ
O
O
HO
HO
C
OH
C
OH
O
O
Оксалоацетат
Аспартат
O
O
CO2
O
HO
HO
C
C
OH
C
CH3
O
O
Оксалоацетат
Пируват
H
NO2
H
NO2
N
HO
O
N
N
C C
+
H2N
HO
C
NO2
C
CH3
O
CH3
NO2
O
2,4-ДНФ-гидразон
Пируват
2,4-динитрофенилгидразин
пировиноградной кислоты
Ход работы.Пробирку с0,25мл субстратно-буферной смеси нагревают втермостате при 37°C в течение 5 мин, добавляют 0,05 мл сыворотки крови и инкубируют 60 мин в термостате при этой же температуре.
Добавляют 0,25 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина и выдерживают в течение 20 мин при комнатной температуре. Затем добавляют еще 2,5 мл NaOH, перемешивают и оставляют еще на 10 мин при комнатной температуре.
Измеряют на фотометре экстинкцию опытной пробы при длине волны 500–560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм. В каче-стве контрольной пробы используется дистиллированная вода.
Расчет. Производят по калибровочному графику.
Норма. АСТ–0,1–0,45ммоль/ч.л(пирувата на1л сыворотки крови за1час инкубации при 37°С).
Клинико-диагностическое значение. Определение активности АЛТ и АСТшироко используется в ранней дифференциальной диагностике различных заболеваний. Оба фермента высокоактивны в различных тканях. Однако наи-большая активность АЛТ приходится на печень, а АСТ – на миокард. В связи с высокой информативностью определение активности АЛТ используется для ранней диагностики болезни Боткина (до появления желтухи и первых симптомов болезни – недомогания, слабости и т. д.), а также ее безжелтуш-ных форм. Высокая активность фермента в крови поддерживается первые 10–15 дней, а затем постепенно снижается. Степень увеличения активности АЛТ коррелирует с тяжестью болезни.
АСТ более специфична для миокарда, поэтому используется для ранней дифференциальной диагностики инфаркта миокарда. Причем увеличение ак-тивности отмечается через 24–36 часов и снижается на 3–7-е сутки.
Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.
Нентов желудочного сока
а) Обнаружение молочной кислоты по реакции Уффельмана.
Принцип метода. При взаимодействии фенолята железа,
З а д а ч и
1. Через какие интермедиаты в ЦТК вступает тирозин?
а) оксалоацетат; б) малат; в) фумарат; г) α-кетоглутарат; д) ацетилкоэнзим А.
Ны в сыворотке крови и в моче диацетилмонооксимным методом
Принцип метода. Мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильно-кислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного желе-за комплекс красного цвета, интенсивн
З а д а ч и
1. При декарбоксилировании какой аминокислоты образуется β-аланин?
а) α-аланина; б) глутамина; в) метионина; г) фенилаланина; д) аспартата.
З а д а ч и
1. Для биологического кода характерны следующие свойства: а) каждый кодон соответствует одной АК; б) каждой АК соответствует только один кодон;
в) кодон мРН
З а д а ч и
1. Формирование вторичной структуры ДНК происходит за счет:
а) водородных связей; б) ионных связей; в) сложноэфирных связей; г) гид-рофобных взаимодействий;
Реакция окисления
Принцип метода. В щелочной среде тиамин окисляется феррицианидом калия в тиохром, обладающий при ультрафиолетовом облучении синей флюоресценцией. Реакц
Диазореакция
Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.
Ход работы.
Ду Сулковича
При гиперпаратиреозе, передозировке витамина D, опухолях костей и не-которых других заболеваниях наблюдается гиперкальциемия, которая ис-ключительно опасна для здоровья. В связи с э
Исходный уровень знаний и навыков
С т у д е н т д о л ж е н з н а т ь :
Строение и свойства основных классов гормонов (стероидные, пептид-
ные
Щитовидной железы
Принцип метода. При щелочном гидролизе тироксина образуется иодид калия, из которого иод вытесняется иодатом калия. Выделившийся свобод-ный йод дает с крахмалом синее
Исходный уровень знаний и навыков
С т у д е н т д о л ж е н з н а т ь : 1 Состав крови.
2 Строение и функции форменных элементов.
3 Основные физико-химические константы крови.
З а д а ч и
1. По какому признаку разделяют белки крови методом электрофореза?
а) по молекулярной массе; б) по растворимости в буферных растворах; в) по заряду.
З а д а ч и
1. Гемоглобин транспортирует по крови:
а) азот; б) углекислый газ; в) кислород; г) аммиак?
2. Какие функции гемоглобина нарушаются при серповиднокл
З а д а ч и
1. Содержание каких компонентов сыворотки крови характеризует нару-шение выделительной функции почек?
а) электролитов; б) мочевины; в) креатинина; г) гамма-
Новости и инфо для студентов