Реферат Курсовая Конспект
Диагностика и специфическая терапия инвазии ротовых простейших у больных пародонтитом - раздел Медицина, Диагностика И Специфическая Терапия Инвазии Ротовых Простейших У Больных Пар...
|
ДИАГНОСТИКА И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ИНВАЗИИ РОТОВЫХ ПРОСТЕЙШИХ У БОЛЬНЫХ ПАРОДОНТИТОМ В методических рекомендациях представлены сведения о ап-робированых методах лабораторной диагностики инвазии ротовых простейших у больных пародонтитом, подробно изложена сравни -тельная оценка этих методов. Даны рекомендации о методах спе¬цифической протистоцидной терапии при заболеваниях пародонта.Методические рекомендации предназначены для врачей-сто¬матологов, врачей- интернов, слушателей факультетов усовершенст¬вования врачей, паразитологов, лаборантов.
Могут быть полез¬ны инфекционистам, оториноларингологам, микробиологам. Методические рекомендации составили: профессор В.Ф.Куцевляк; профессор В.А.Никитин; профессор Ю.Л.Волянский; профессор С.В.Бирюкова; к.м.н. Н.Ф.Дзюбан; ассистент Ю.В.Лахтин. Кафедры терапевтической стоматологии, клинической микробиоло¬гии и иммунологии Харьковского института усовершенствования врачей.Рецензент: профессор Г.Ф.Катурова 15ВМ 966-566-013-6 В полости рта, в частности пародонталышх карманах, у больных пародонтитом встречается два вида протистов: Entamoeba gangivalis - десневая амеба и Trichomonas tenax - ротовая трихомонада.
Они обитают и в кариозных полостях зубов, крип¬тах миндалин. Многочисленные исследования, посвященные этой проблеме, не позволяют окончательно решить вопрос о роли их в патологическом процессе.Присутствие ротовых протистов у лиц с интактным пародонтом дают основание авторам отнести их не к паразитам, а к комменсалам.
Однако клинические и лабораторные наблюдения показывают, что при разных патологических состояниях изме¬няется морфологическая структура десневых амеб, а при инва¬зии ротовыми трихомонадами течение заболевания более длительное, затяжное. Особенно тяжело протекает пародонтит, при этом наблюдается обильное гнойное отделяемое из пародонтальных карманов.Кроме того, в данных случаях пародонтит плохо поддается лечению обычными лекарственными средствами, а наз¬начение специфической протистоцидной терапии быстро приводит к купированию воспалительного процесса.
В пародонтологической практике к назначению протистоцидных средств прибегают довольно часто, нередко вслепую, без лабораторного подтверждения инвазии простейшими. Поэтому своевременная лабораторная диагностика протоинвазии ротовой полости и обоснованное проведение протистоцидной терапии у больных пародонтитом приобретают актуальное значение.К методам протозоологической диагностики инвазии рото¬вых протистов относятся следующие: протозооскопия нативного препарата, протозооскопия окрашенного мазка и культуральное исследование. 1. ПРОТОЗООСКОПИЯ НАТИВНОГО ПРЕПАРАТА Принцип метода: взятый экссудат из пародонтального кармана смывают в капле физиологического раствора на предметном стекле и просматривают под микроскопом.
Реактивы и оборудование: - стерильная корневая игла с турундой; - предметное и покровное стекла; - физиологический раствор или раствор Рингера-Локка; - микроскоп.
Забор материала производят из пародонтальных карманов.Стерильную корневую иглу с турундой вводят в пародонтальный карман и поворачивают вокруг своей оси, затем переносят в каплю физиологического раствора, помещенную на предметном стекле, смывают в ней содержимое с иглы, покрывают покровным стеклом и микроскопируют при об. 40, ок. 7. Физиологический раствор должен быть теплым, поскольку двигательная активность трихомонад в холодном растворе сни¬жается или прекращается вообще, что может привести к отри¬цательному результату.
Для этого применяют специальные наг¬ревательные столики. Мы в этих целях используем в качестве источника света небольшую бытовую лампу, для чего вынимаем зеркало-отражатель в микроскопе и вставляем лампу под кон¬денсор. Инфракрасное излучение лампы нагревает предметное стекло с физиологическим раствором. Entamoeba gangivalis в нативном препарате выявляются в 100% случаях.Они округлой формы, очень медленно передвигаются за счет выпячивания псевдоподий. Псевдоподии появляются с одного полюса либо сразу с нескольких в разном направлении.
Они прозрачные, выступают в виде языков с закругленным кон¬цом. Появление псевдоподии является главным отличительным признаком амеб от лейкоцитов, которые при воспалительном процессе в пародонте порой занимают все поле зрения.При невнимательном, беглом просмотре поля зрения за амебы можно принять разрушенные лейкоциты, которые теряют четкую круглую форму и ядро выходит за пределы оболочки.
Если псевдоподии прозрачные, то центр амеб мутный, можно увидеть фагоцитированные ядра лейкоцитов. Размеры их вариабельны-: с лейкоцит и даже меньше, крупнее лейкоцита, иногда достига¬ют гигантских размеров. Trichomonas tenax в нативном препарате нами выявляются в 35,4% из всех положительных находок.Они имеют несколько вытяну¬тую форму, похожи на плод груши. Отличительной чертой их от других клеточных элементов содержимого пародонтальных кар¬манов является выраженная двигательная активность.
Движение трихомонад энергичное, "порхающее", сопровождается выбрасы¬ванием жгутиков на одном из полюсов. Во время движения те¬ло простейших сокращается и они то вытягиваются по оси, то округляются. Двигательная активность их настолько энергична, что они могут быстро покидать поле зрения.В тех случаях, когда нативный препарат приготавливают в большом количестве физиологического раствора, капля получается толстой и три-хомонады быстро "уходят" в глубину капли, что может привес¬ти к отрицательным результатам.
Количество особей в препа¬рате незначительное, от 1 до 2-3, поэтому нативный препарат следует просматривать тщательно. При выраженном воспалительном процессе в пародонте с плазма всегда базофильно окрашена, цвет колеблется от нежно-голубого до насыщенно-синего.Она разделена на ин¬тенсивно окрашенную с вакуолями и включениями эндоплазму и более просветленную гомогенную эктоплазму в виде узкой полоски по периферии, где никаких включений и вакуолей не обнаруживается.
За счет эектоплазмы образуются выросты или псевдоподии. В эндоплазме есть вакуоли, фагоцитированные лейкоциты и бактерии, очень редко эритроциты. Размеры амеб разные. Около 40% экземпляров крупные, превышают лейкоциты. В мазке, окрашенном метиленовым синим, четко просматривается оболочка амеб, ядро темно-синего цвета, цитоплаз¬ма светло-синяя, вакуоли бесцветные.Характер экссудата влияет на количество амеб. При гной¬ном экссудате их число возрастает более чем в 2 раза по сравнению с серозным, Результаты, полученные нами, показали, что 63,9% осо¬бей фагоцитируют лейкоциты.
В среднем на одну амебу при се¬розном экссудате приходится по 1,8 фагоцитированному лейко¬циту, при гнойном экссудате интенсивность поглощения лейко¬цитов возрастает до 2,42. Ядра фагоцитированных лейкоцитов окрашиваются в интенсивный фиолетовый цвет. Эритрофагия и бактериофагия встречаются значительно реже. У 72,58% особей мы обнаруживали псевдоподии.С увели¬чением размеров амеб увеличивается частота обнаружения псевдоподий.
Аналогичная ситуация наблюдалась и с вакуоля¬ми в цитоплазме. Характер экссудата существенно влияет на качественные изменения в структуре простейших: при гнойном экссудате псевдоподии более выражены, иногда их много, ва¬куоли крупнее. Выявляемость амеб в мазке и отпечатке одинакова и составляет 98,13%. В отпечатке протисты скапливаются сразу по несколько экземпляров в поле зрения.Так как отпечаток занимает небольшую площадь на предметном стекле, то этот способ приготовления препарата имеет преимущества перед мазком, особенно в тех случаях, когда количество простейших невелико. Однако фон препарата, состоящий из большого скоп¬ления лейкоцитов, эпителиальных клеток и обильной микрофло¬ры, не позволяет детально изучать их морфологию.
Этот не¬достаток отсутствует в мазке, но при этом приходится прос¬матривать большую площадь мазка. Trichomonas tenax в окрашенном препарате имеют свою специфичес¬кую структуру.В 62,82% они округлой формы, несколько реже грушевидной, веретенообразной или в виде усеченной пирамиды. На одном из полюсов имеется ядро, расположенное эксцентрич¬но. Ядро имеет вид косточки сливы, удлиненное у 56,4% эк¬земпляров, округлое у 37-42% простейших.
Очень редко оно точечное, каплевидное. По Романовскому-Гимза ядро окрашивается оксифильно, бледно. Цитоплазма окрашена базофильно, слабо, имеет сет¬чатую структуру, иногда гомогенная.У единичных особей в цитоплазме встречаются фагоцитированные бактерии. Поглоще¬ния лейкоцитов трихомонадами мы не наблюдали.
Несмотря на высказывания некоторых авторов об окраши¬вании жгутиков и аксостиля краской Романовского, мы не встретили ни одного экземпляра трихомонад, у которых эти органы прокрашивались. При окраске метиленовым синим ядро трихомонад интенсив¬но окрашено в синий цвет, протоплазма нежная, сетчатая, свет¬ло-синяя, вакуоли бесцветные.Как и десневые амебы трихомонады имеют вариабельные размеры. Около 40% экземпляров приближаются к размерам лейкоцитов в препарате, остальные либо значительно мень¬ше лейкоцитов, либо несколько превышают их. Из всех выявленных случаев трихомонадной инвазии в отпечатке протистов обнаруживали в 50,77%, в мазке - 89,23%, Так как количество простейших этого вида в препарате состав¬ляет от 1-3 до 15-20, то при их небольшом числе обильный фон в отпечатке не позволяет четко дифференцировать протис¬тов. В мазке же все клеточные элементы разрознены, обособ¬лены друг от друга, поле зрения хорошо просматривается, поэ¬тому даже единичные экземпляры легко идентифицируются.
Но для этого необходимо просматривать весь препарат, их поиск представляет определенные трудности. 3. КУЛЬТУРАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ П ринцип метода: содержимое пародонтальных карманов засевают в питательную среду и после инкубации микроскопируют раздавленную каплю. Реактивы и оборудование: - стерильная корневая игла с турундой; - предметное и покровное стекла; - пробирки; - капилляр или пипетка; - питательная среда; - термостат; - микроскоп.
Забор содержимого пародонтальных карманов производят аналогично предыдущим методам, однако наиболее приемлемым является забор стерильным стоматологическим экскаватором № 2 из глубины кармана.
Содержимое смывают в жидкую питательную среду, которую затем инкубируют в термостате при Т - 37° С. Культура развивается в течение 3-6 суток.По окончании срока инкубации со дна пробирки капилляром или пипеткой берут осадок, каплю помещают на предметное стекло, покрывают покровным и микроскопируют с об. 40, ок. 7. Применяется много питательных сред, но основными ингридиентами их являются физиологический раствор, сыворотка и углеводы.
Рекомендуют использовать простую сывороточную среду. Она проста в приготовлении и дает хороший рост трихомонад. Для ее приготовления берут 9 частей стерильного физиологи¬ческого раствора, добавляют 1 часть лошадиной или бычьей сыворотки и 1 петлю стерильного рисового крахмала.Среду разливают в стерильные пробирки по 5-10 мл. Наш опыт по культуралъной диагностике ротовых простей¬ших показал, что простая сывороточная среда не всегда дает положительные результаты.
Очевидно, это связано с региональ¬ными физико-химическими характеристиками воды, из которой готовят физиологический раствор. Физиологический раствор, приготовленный аптекой, у нас всегда имел рН 5,1 и питатель¬ная среда на таком растворе без добавления буферных солей роста трихомонад не давала. Поэтому мы рекомендуем применять среду Павловой.Способ приготовления: хлористый натрий - 4,25 г, двузамещенный фос¬форнокислый натрий /Na2HPO4 X 2 H2O2 , можно и Na2HPO4 X 12 H2O2 - 0,3 г, однозамещенный фосфорнокислый калий / K2HPO4 - 0,23 г, дистиллированная вода - 500,0 мл. Раст¬вор стерилизуют в автоклаве при 1,5 атм в течение 20 минут.
Перед засеванием материала раствор разливают в пробирки по 9,5 мл, добавляют О,5 мл лошадиной сыворотки и петлю стериль¬ного рисового крахмала. В качестве сыворотки применяют нормальную лошадиную сыворотку для приготовления питательных сред или сыворотку лошадиную сухую.
Предварительно флакон с нормальной лошадиной сывороткой раскупоривают и оставляет в термостате на 3-е су¬ток для испарения консерванта, а сухую растворяют в дистил¬лированной воде. Культуральным методом на среде Павловой десневые амебы выявлены в незначительном числе /3,74% из всех положитель¬ных результатов, полученных другими протозоологическими ме¬тодами/, поэтому для выделения их лучше использовать среду следующего состава: физиологический раствор - 1000,0 мл, мясо-пептонный бульон - 20,0 мл, печеночный экстракт -20,0 мл, глюкоза - 2,5 г, Na2HPO4- 0,45 г, K2HPO4 - 0,45 г, рН = 7,4- 7,8, К простерилизованной среде добавляют 10,0 -15,0 мл инактивированной лошадиной сыворотки, разливают в пробирки; по 6— 10,0 мл ив каждую вносят 1-2 петли стерильного рисового крахмала. Амебы развиваются в щелочной среде, а трихомонады предпочитают кислую.
Рост трихомонад на жидкой питательной среде Павловой выявлен в 76,92% среди всех положительных случаев.
Определение в культуре этих простейших не представляет особого тру¬да, посколько в поле зрения скапливается от 5 до 30-50 осо¬бей. Незначительная часть ротовых трихомонад имеет тот же вид, что и в нативном препарате. Подавляющее же число особей округляется, приобретает шарообразную форму. В цитоплазме видны заглоченные зерна крахмала.Выбрасывание жгутиков ак¬тивное, у некоторых крупных трихомонад можно увидеть движение ундулирующей мембраны в виде волны, пробегающей подлиннику тела. 4. ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ ПРОТОЗООСКОПИЯ Учитывая, что в некоторых случаях протозооскопия окра¬шенных препаратов не позволяет четко отдифференциовать мел¬кие особи десневых амеб без фагоцитированых лейкоцитов, ваку¬олей, псевдоподий от ротовых трихомонад, предложено использо¬вать люминесцентную протозооскопию. Принцип метода: приготовлений мазок или отпечаток обрабатывают флюоресцирующим веществом, после чего объект, невидимый в ультрафиолетовом свете, приобретает иной цвет. Оборудование и реактивы: - корневая игла с турундой; - предметное стекло; -фиксатор /10% раствор формалина/; - флюоорохром /акридин оранжевый 1:10 000/; - люминесцентный микроскоп.
Содержимое пародонтальных карманов переносят на предмет¬ное стекло в виде отпечатка или мазка, высушивают, фиксируют в10% растворе формалина в течение 10 минут, вновь высушива¬ют и окрашивают раствором акридина оранжевого в течение 1 мину¬ты. Микроскопию производят с иммерсионным объективом 90. Впервые морфологическая характеристика ротовых простей¬ших при помощи люминесцентной микроскопии дана П.С.Флис /1976/. Десневые амебы, окрашенные флюорохромом, хорошо опреде¬ляются.
Для них характерно темно-зеленое свечение цитоплаз мы и более светло окрашенное ядро. Ротовые трихомонады тоже имеют специфическое свечение.
Цитоплазма окрашивается в кирпично-красный цвет, ядро люминесцирует достаточно ярко белесовато-оранжевым цветом.Чет¬ко виден аксостиль, жгутики чаще не определяются.
Лейкоциты, создающие фон препарата, имеют зеленоватый оттенок. Не всегда ротовые простейшие обнаруживаются сразу все¬ми методами. Каждый из вышеназванных методов имеет свои пре¬имущества и недостатки.Протозооскопия нативного препарата в должной мере явля¬ется объективным методом, однако его применение должно быть непосредственно после взятия материала и любое промедление во времени приводит к снижению двигательной активности трихомонад, что в дальнейшем приведет к затруднению в дифференциации с другими клеточными элементами.
Окрашенный препарат пригоден для выявления десневых амеб, но обильный фон в препарате не позволяет обнаружить единичные экземпляры трихомонад. В препарате, приготовленном в виде мазка, легче находить как десневые амебы, так и трихомонады, но при этом возникает необходимость просмотра большой пло¬щади мазка. Культуральным методом на среде Павловой целесообразно выявлять только Trichomonas tenax.Недостатком метода является мень¬шая частота выявляемости простейших по сравнению с мазком.
Это связано в большей части с техническими погрешностями: ма¬ло материала для исследования, помещение материала в не подо¬гретую среду, несоблюдение режима инкубации, рН среды и т.д. Указанные недостатки компенсируются тем, что диагностику протоинвазии осуществляют параллельно всеми методами.Техника диагностических протозоологических исследований проста, оборудование и реактивы доступны для лабораторий и стоматологических учреждений любого уровня. Несмотря на это выявление ротовых простейших требует натренированности, тер¬пения и внимания лаборантов.
СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ПРОТОИНВАЗИИ ПОЛОСТИ РТА Терапия пародонтита строится на принципах максимально индивидуализированного комплексного подхода с учетом общего и местного статуса больных. Весь комплекс лечебных меропри¬ятий должен быть направлен на ликвидацию этиологических и пато¬генетических звеньев развившегося процесса.У больных пародонтитом с инвазией ротовыми трихомонадами среди этих меро¬приятий важное значение приобретает воздействие на простей¬ших в пародонтальных карманах.
С этой целью применяют специ¬фические протистоцидные препараты для местного и общего ле¬чения.Для местной терапии используют 1% р-р трихопола, 1% р-р трихомонацида, р-р фурацилина 1:5000, 1% р-р мефенамината натрия, 1,5% р-р метиленового синего, 0,5-1% р-р перманганата калия, 40% р-р гексаметилентетрамина. Вышеуказанные пре¬параты вводят в пародонтальные карманы в виде инсталляций и орошений.
При выборе метода введения и экспозиции лекарственного вещества следует учитывать сроки гибели трихомонад.По данным З.А.ФЛИС, И.А.Бенюмовой /1976/ растворы трихопола, трмхомонацида, фурацилина в раздавленной капле куль¬туры протистов оказывают губительный эффект на 30-40 минуте, иногда на 60-й. Следовательно, их рационально оставлять в пародонтальных карманах под повязкой. Свежеприготовленный 1% р-р мефенамината натрия на 5-18 минуте обездвиживает трихомонады, а хранившийся длительное время оказывает эффект на 20-30-й минуте. 0,5-1% раствор перманганата калия обездвиживает прос¬тейших на 10-30-й минуте.
Эти вещества целесообразно вводить в виде инстилляций на турундах, при этом необходима частая замена на свежие турунды, так как концентрация лекарств сни¬жается вследствие разбавления слюной, кровью, экссудатом. Очень удобно иметь в кабинете навески с порошком мефенамината натрия по 0,5 г. Из них легко приготовить свежий 1% раствор /0,5 г порошка растворить в 50,0 мл дистиллированной воды/. Гексаметилентетрамин /уротропин/ по нашим наблюдениям в большинстве случаев вызывает не только обездвиживание, но и распад трихомонад на протяжении 1-2-х минут.
Им можно оро¬шать пародонтальные карманы при помощи распылителя стоматоло¬гической установки. Результаты наших исследований показали, что после воздействия на трихомонад 0,02% раствором декаметоксина основная масса особей прекращает движение на 4-7 минуте, 0,05% раствор хлоргексидина снижает двигательную активность простейших или прекращает ее на 7-10-й минуте.
Несмотря на положительный протистоцидный эффект указан¬ных препаратов в раздавленной капле применение их в клинике не всегда приносит желаемый результат. Очевидно, это связано с труднодоступностью зубодесневых карманов. Перед внесением лекарственных веществ следует тщательно удалить зубные отложения, провести обильное орошение карманов другими антисептическими средствами.Это будет способствовать механическому вымыванию простейших, микрофлоры, экссудата и таким образом протистоцидные препараты могут непосредственно воздействовать на паразитов. Чувствительность Trichomonas tenax к лекарственным средствам имеет индивидуальные штаммовые колебания.
Для выяснения протистоцидного эффекта назначаемого лекарства мы рекомендуем проводить определение чувствительности ротовых трихомонад в раздавленной капле.С этой целью каплю штамма Trichomonas tenax9 выращенной на пи¬тательной среде, помещают на предметное стекло, покрывают покровным стеклом, добавляют исследуемое лекарственное вещество и исследуют под микроскопом. Сроком гибели простейших считают то время, когда наступил их распад.
Местная терапия не во всех случаях приводит к санации пародонтальных карманов от простейших. Обязательным условием для получения положительного результата является назначение протистоцидных препаратов внутрь.Наиболее широкое применение получил трихопол /метрони-дазол) Его назначают по 0,25 г 2 раза в день в течение 10 дней или по одной из следующих схем: 1/ 1-й день - 0,5 г 2 раза в сутки; 2-й день - 0,25 г 3 раза в сутки; 3-4-5-6-й день - 0,25 г 2 раза в сутки. 2/ 1-й день и 2-Й день - 0,25 г 4 раза в сутки; 3-й и 4-й день - 0,25 г 3 раза в сутки; 5-6-7-й день - 0,25 г 2 раза в сутки , З/ по 0,25 г 4 раза в сутки в течение 5 дней. Курсовая доза трихопола должна составлять 5,0 г. Противопоказанием к назначению трихопола являются забо¬левания кроветворных органов, ЦНС, беременность.
Во время приема препарата нельзя употреблять алкоголь, так как при взаимодействии с ним образуется дисульфирам, который способст вует возбуждению и развитию психоза.
В последнее время во всем мире регистрируется увеличе¬ние числа штаммов, резистентных к трихополу. Нитазол /трихоцид, трихолавал/. Назначают по 0,1 г 3 раза в сутки после еды в течение 15 дней. Через 7-10 дней курс повторяют.Тинидазол /фасижин/. Назначают 4 таблетки по 0,5 г за один прием во время или после еды. Противопоказания к назна¬чению такие же, как и у трихопола.
Макмирор /нифурател/. Помимо протистоцидного эффекта оказывает влияние на смешанную бактериальную флору /стрепто¬кокки, стафилококки, кишечная палочка, протей/, грибки {Candida albikans). Активность воздействия на трихомонад в 10 раз выше, чем у метронидазола. Назначают по 3-6 таблеток /по 200 мг/ в день в течение 1-2 недель.Следует подчеркнуть, что лечение пародонтита протистоцидными препаратами проводят обязательно в комплексе с дру¬гими мероприятиями /консервативными, хирургическими, ортопедическими/. Не устранив пародонтозогенную ситуацию в п.
– Конец работы –
Используемые теги: Диагностика, Специфическая, терапия, инвазии, ротовых, простейших, больных, пародонтитом0.11
Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ: Диагностика и специфическая терапия инвазии ротовых простейших у больных пародонтитом
Если этот материал оказался полезным для Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:
Твитнуть |
Новости и инфо для студентов