Полученный осаждением органическими растворителями препарат нами назван протовортманин Г10х. В дальнейшем представляло интерес изучить его компонентный состав и идентифицировать протеолитические фракции.
Для этого был использован метод дискового электрофореза в ПААГ. Электорофорез вели с учётом нейтральнойприроды протеолитического комплекса.
Компонентный состав препарата представлен четырьмя фракциями, отличающимися подвижностью в электрическом поле, размерами и интенсивностью окраски белковых полос.
Идентификацию протеолитических фракций проводили двумя способами насыщением ПААГ денатурированным гемоглобином pH 7,2 после дискового электрофореза и последующим выявлением прогидролизованных участков экстракцией белкового спектра из ПААГ дистиллированной водой с определением протеолитической активности в экстрактах. При гидролизе гемоглобина в ПААГ обнаружены две протеолитические фракции, которые проявились в виде двух светлых полос.
Это свидетельствовало о том, что комплекс ферментов, гидролизующий белки в нейтральной области pH сложен и представлен двумя фракциями. Аналогичными были данные при использовании метода экстракции белковых полос из геля. Таким образом, используя методы дискового электофореза было установлено, что компонентный состав полученного препарата представлен четырьмя фракциями, две из которых протеолитические. Кроме активного протеолитического комплекса препарат протовортманин Г10х содержал в своём составе глюкоамилазу ГЛА 20ед г и альфаамилазу 3ед г, сопутствующие ферменты, а также баластные вещества.
Для получения гомогенных протеолитических фракций необходимо ввести более глубокую очистку. 3.3
Вещества белковой природы, способные каталитически ускорять химические реакции, называют ферментами.
Роль ферментов в жизнедеятельности животных, растений и микроорганизмов… Биологические катализаторы по ряду признаков резко отличаются от неорганических катализаторов.
Протеиназы микробного происхождения
Протеиназы микробного происхождения. Протеолитические ферменты синтезируются практически всеми живыми существами. В промышленных целях как источник протеиназ используются животные ткани, растения и
Выделение и очистка препаратов протеиназы
Выделение и очистка препаратов протеиназы.
Современный уровень науки и техники позволяет получить не только комплексные, но и гомогенные, кристаллические ферменты. Их, как правило, выделяют
Расщепление коллагенсодержащего сырья и его применение
Расщепление коллагенсодержащего сырья и его применение.
Перспективное направление обработки коллагенсодержащего сырья - его ферментация.
Авторами обзора 5 показано, что употребляемые
Материалы и методы исследования
Материалы и методы исследования. Определение величины рН. Величину рН определяли потенциометрически на рН-метре ЛПУ-01. Для измерений значений рН растворов в температуре отличной от 20oС, применяли
Определение коллагеназной активности
Определение коллагеназной активности.
Коллагеназную активность определяли по содержанию оксипролина в смеси, образовавшегося в результате действия фермента на нативный коллаген. С этой целью
Определение содержания аминного азота
Определение содержания аминного азота.
Метод основан на образовании цветного комплекса при взаимодействии аминогрупп аминокислот с гидроксидом меди. В пробирку, содержащую 100 мг сухого медн
Определение гомогенности очищенных препаратов
Определение гомогенности очищенных препаратов.
Электрофорез проводили по методу Дэвиса на приборе фирмы Reanol Венгрия в щелочной буферной системе, рН 8,9. Концентрация акриламина в мелкопор
Идентификация протеиназ в ПААГ
Идентификация протеиназ в ПААГ. Для проявления в гелях полос с протеиназой их выдерживали в денатурированном растворе гемоглобина 2 концентрации в течение 15 - 30 минут при температуре 30oС. Затем
Разработка условий выделения препарата Penicillium wortmannii BKMF
Разработка условий выделения препарата Penicillium wortmannii BKMF. Для выделения ферментов из различных сред в лабораторных условиях и в промышленности чаще всего применяют органические растворите
Влияние температуры и рН на активность фермента
Влияние температуры и рН на активность фермента. Нами была поставлена цель определить рН и температурные оптимумы действия выделенных протеиназ Penicillium wortmannii 2091 и дать их сравнительную х
Исследование процессов кислотной и термической инактивации
Исследование процессов кислотной и термической инактивации.
Изучение термо- и рН-стабильности ферментов часто несёт прикладной характер. Исследование этих характеристик проводится остаточной
Влияние ионов металлов и ингибиторов на активный центр фермента
Влияние ионов металлов и ингибиторов на активный центр фермента. Главным признаком, используемым при отношении протеолитических ферментов к тому или иному классу, является строение каталитического
Межпредметность - современный принцип обучения
Межпредметность - современный принцип обучения. Совершенствование содержания образования в школе опирается на комплексное использование в обучении межпредметных связей. Это является одним из критер
Межпредметные связи на уроках химии
Межпредметные связи на уроках химии.
Реализация межпредметных связей химии с другими дисциплинами предполагает осуществление комплексного подхода к отбору учебного материала, т.е. привлечени
Хотите получать на электронную почту самые свежие новости?
Подпишитесь на Нашу рассылку
Наша политика приватности обеспечивает 100% безопасность и анонимность Ваших E-Mail
Новости и инфо для студентов